Гпк рф статья 131: ст. 131, 132 ГПК РФ Требования к исковому заявлению по разделу имущества

Последовательность эксендина-4 была выбрана в качестве нацеливающего пептида GLP-1 в этом исследовании после модификации с помощью недавно разработанного NHS-THP.

4. Выводы и перспективы

Считается, что в будущих клинических исследованиях неинвазивная ПЭТ-визуализация с радиоактивно меченными индикаторами, такими как синтезированный GLP-1-пептид-THP, может поддержать диагностику определенных типов рака со сверхэкспрессией GLP-1R. Более того, новый разработанный NHS-THP представляет собой новый способ легкого конъюгирования фрагмента THP с различными нацеливающими молекулами (например,g., антитела, антикалины или пептиды) с использованием либо твердофазного подхода, такого как в этом исследовании, либо растворного (нецелевого) подхода, прокладывая путь к синтезу различных продуктов со всеми преимуществами химии THP. Этот подход был оценен в предварительной серии экспериментов с sdAb, конъюгированным с THP, и мы подтвердили, что конъюгат количественно мечен радиоактивной меткой ⁶⁸ Ga в микромолярных концентрациях.

Границы | Экспрессия CCL19 и CCR7, сигнальные пути и адъювантные функции в вирусной инфекции и профилактике

Введение

CCL19 и его рецептор CCR7 контролируют разнообразный набор миграционных событий в адаптивном иммунитете после контакта антигена с иммуноцитами.Недавно были уточнены некоторые правила, управляющие механизмами оси CCL19-CCR7 в направлении самонаведения лимфоцитов и встречи с вирусами in vitro (Comerford et al., 2006; de Paz et al., 2007; Jafarnejad et al., 2017) . In vivo , как противовирусные, так и адъювантные иммунные ответы регулируются посредством взаимодействий между вирусными белками, хемокиновыми рецепторами и их нижележащими адапторными компонентами. Изменения биодоступности CCR7 / лигандов (CCL19 и CCL21) могут модулировать пути иммунопатогенеза хозяина, тем самым изменяя инвазию вируса (Comerford et al., 2013; Steen et al., 2014). Таким образом, мы систематически оценивали вклад полиморфизма экспрессии CCL19 и CCR7, передачи сигнала и адъювантных механизмов на основе CCL19 при вирусных инфекциях.

CCL19 и CCL21 имеют консервативный тетрацистеиновый мотив, но имеют только 32% -ную аминокислотную идентичность. Структурно CCL21 отличается от CCL19, потому что он имеет уникально длинный C-концевой хвост, содержащий дополнительные 37 аминокислот (6 остатков цистеина), которые имеют высокий положительный заряд и способны связывать гликозаминогликаны (GAG) (Nagira et al., 1997; Steen et al., 2014). CCL19 секретируется зрелыми дендритными клетками (mDC), в то время как CCL21 секретируется эндотелием афферентных лимфатических сосудов (это было показано на мышах, но доказательства у людей отсутствуют), и оба преимущественно секретируются просветом венул высокого эндотелия. , стромальные клетки дренирующего лимфатического узла и селезенки (Steen et al., 2014; Wang et al., 2018). Из-за своей дифференциальной структуры и паттернов экспрессии CCL19 и CCL21 проявляют разную аффинность связывания с конкретным гепарином или гепарансульфатом, и для функций in vivo требуются разные сигнальные ответы (Rot and von Andrian, 2004; de Paz et al., 2007; Raju et al., 2015). CCR7 был первым идентифицированным лимфоцит-специфичным рецептором, связанным с G-белком (GPCR) с семью трансмембранными перекрывающими альфа-спиралями (Birkenbach et al., 1993). CCR7 экспрессируется на двойных отрицательных и единичных положительных тимоцитах, включая наивные Т-клетки, Т-клетки центральной памяти, регуляторные Т-клетки, наивные В-клетки, полузрелые / зрелые ДК и NK-клетки, а также меньшую часть опухолевых клеток, и действует как ключевой регулятор, направляющий гомеостатические лимфоциты во вторичные лимфоидные органы (Ohl et al., 2004; Комерфорд и др., 2013; Хаузер и Леглер, 2016; Wang et al., 2018; Laufer et al., 2019). Ось CCR7-лиганд выполняет следующие три фундаментальных «клеточных рефлекса»: получение сообщений, семантическое извлечение и инициирование клеточных ответов (Bardi et al., 2001; Rot and von Andrian, 2004; Griffith et al., 2014). Интернализация хемокинового рецептора за счет связывания с хемокином помогает регулировать активность хемокинов (Rot and von Andrian, 2004). CCL19 — единственный известный хемокин, который эффективно стимулирует опосредованное β-аррестином фосфорилирование и интернализацию CCR7, что приводит к десенсибилизации рецептора и миграции антигенпрезентирующих дендритных клеток (DC) (Bardi et al., 2001; Тиан и др., 2014; Андерсон С. и др., 2016). В частности, CCL19 демонстрирует очевидную интернализацию в зависимости от концентрации и времени в Т-клетках CD4 ⁺ и CD8 ⁺ , что отличается от CCL21 (Hjortø et al., 2016). Оба лиганда способны активировать передачу сигналов G-белка и вызывать 3D-хемотаксис и поток Ca ²⁺ , но было показано, что CCL19 относительно более эффективен (Bardi et al., 2001; Steen et al., 2014; Hjortø et al. ., 2016) (рисунок 1).

Рисунок 1. Схема CCR7 и его лигандов. CCL19, CCL21 и бесхвостый CCL21 связывают CCR7, 7-трансмембранный рецептор. Связывание рецептора / лигандов приводит к активации GPCR и последующей интернализации с последующим уменьшением количества рецепторов, экспонируемых на поверхности, и активацией определенных внутриклеточных путей. ГАГ, гликозаминогликан.

Хемокины представляют собой класс цитокинов, которые контролируют миграцию иммуноцитов к участкам инфекции и воспаления во многих биологических процессах. При различных взаимодействиях вирус-хозяин хемокиновые рецепторы могут играть сенсорную функцию в иммунной системе, приводя к образованию характерных отпечатков пальцев хемокинов (Chensue, 2001; Alcami, 2003).Хемокиновая система может имитироваться вирусами, а вирусные белки могут действовать как антагонисты или неподходящие агонисты для использования хемокиновых рецепторов хозяина в качестве способов клеточной инвазии (Rot and von Andrian, 2004). Например, вирус иммунодефицита человека типа 1 (ВИЧ-1) маскируется под «хемокин», чтобы способствовать его слиянию с клетками-мишенями (Murphy, 2001). Кроме того, поксвирусы и герпесвирусы кодируют гомологи хемокиновых рецепторов, которые экспрессируются на их клетках-мишенях, что позволяет хемокинам хозяина направлять инфицированные клетки в отдаленные места для распространения вируса (Alcami, 2003).Основываясь на важной роли оси CCL19-CCR7 в организации иммунологических и воспалительных реакций, мы суммируем в этом обзоре ее патогенные роли в некоторых состояниях вирусной инфекции, таких как инфекции, вызванные ВИЧ-1 (Wilflingseder et al., 2004; Cameron et al. ., 2010; Damås et al., 2012; Hong et al., 2012; Ramirez et al., 2014; Anderson JL et al., 2016), вирус скрепи (Kim et al., 2018), респираторно-синцитиальный вирус (RSV ) (Le Nouën et al., 2011; Inchley et al., 2013; Alturaiki et al., 2018), вирус Эпштейна-Барра (EBV) (Ehlin-Henriksson et al., 2009; Данхэм и др., 2017; Wu et al., 2017), вирус гриппа (Debes et al., 2004; Piqueras et al., 2006), вирус денге (DENV) (Wu et al., 2009, 2011; Hsu et al., 2015), гепатит Вирус B (HBV) (Zhang et al., 2009; Cao et al., 2014) и вирус Западного Нила (WNV) (Bardina et al., 2017). Ось CCL19-CCR7 также играет роль в основанной на вакцине защите от множества вирусов, таких как ВИЧ-1 (Hu et al., 2013), вирус простого герпеса 1 (HSV-1) (Lee et al., 2003; Toka et al., 2003), HSV-2 (Yan et al., 2015), вирус гепатита C (HCV) (Hartoonian et al., 2014) и вируса псевдобешенства (Han et al., 2009). Кроме того, взаимодействие CCL19-CCR7 помогает иммунным клеткам высвобождать антивирусные цитокины (например, IFN-γ и IL-4), которые способствуют пролиферации Т-клеток и захвату антигена DC (Hu et al., 2013, 2017).

В течение многих лет профилактические вакцины были направлены на получение устойчивых нейтрализующих реакций антител (Ab). Тем не менее, все больше данных свидетельствует о том, что опосредованный Т-клетками иммунитет также играет решающую роль в борьбе с устойчивыми вирусными инфекциями, такими как ВИЧ-1, цитомегаловирус (ЦМВ) и инфекции гепатита С (Kallas et al., 2016). Недавно были исследованы различные многообещающие профилактические вакцины в сочетании с адъювантными цитокинами или хемокинами, такими как CCL19, для усиления вирус-специфических клеточных иммунных ответов за счет полифункциональности цитокинов. Для будущих терапевтических инициатив важно понимать роль оси CCL19 / CCR7 в модулировании миграции и активации иммунных клеток, чтобы потенциально различать положительные и отрицательные эффекты. В этом обзоре мы оцениваем функциональную эффективность CCL19 и CCR7 при вирусных инфекциях и профилактике, что может способствовать разработке более эффективных, долговечных и безопасных антивирусных фармацевтических препаратов или вакцин на основе Т-клеток.

Снижение экспрессии CCR7 и менее эффективные хемотаксические ответы на CCL19 в контексте вирусных инфекций

CCR7 ⁺ иммунные эффекторные клетки становятся дисфункциональными во время некоторых вирусных инфекций, за чем следует снижение экспрессии CCR7 во время адаптивных иммунных ответов (Förster et al., 2008). CCR7 является определяющим фактором для неполяризованных центральных (CCR7 ⁺ ) и поляризованных эффекторных Т-клеток (CCR7 ^— ) Т-клеток (Unsoeld et al., 2002).CCR7 экспрессируется на высоком уровне на наивных и центральных Т-клетках памяти и позволяет гомеостазным субпопуляциям Т-клеток рециркулировать и возвращаться в участки Т-клеток в лимфоидных органах, таких как области белой пульпы селезенки и лимфатических узлов (Rot and von Andrian, 2004 ; Schaerli, Moser, 2005). Во время заражения вирусом лимфоцитарного хориоменингита (LCMV) CCR7 подавляется на вирус-специфических CD8 ⁺ эффекторных Т-клетках in vivo (Potsch et al., 1999). Подавление экспрессии CCR7 на вирус-специфических эффекторных Т-клетках CD8 ⁺ делает клетки невосприимчивыми к хемокинам из вторичных лимфоидных тканей, что ограничивает хоминг Т-клеток.Было высказано предположение, что исключение эффекторных Т-клеток CD8 ⁺ из Т-зоны может представлять собой важный механизм, защищающий профессиональные антигенпрезентирующие клетки (АПК) от атак цитотоксических Т-клеток и, таким образом, предотвращая преждевременное снижение иммунных ответов. . Во время инфицирования ВИЧ-1 ось CCL19 / CCR7 помогает установить латентную инфекцию. Характер экспрессии CCR7 сильно коррелирует с увеличением резервуаров вируса ВИЧ-1 и связан с хронической инфекцией ВИЧ-1.Стимуляция ВИЧ-1-инфицированных первичных Т-лимфоцитов CD4 ⁺ с помощью CCL19 приводит к усилению как подвижности CCR7-зависимых Т-клеток, так и вседозволенности покоящихся Т-клеток памяти, что приводит к эффективному размножению ВИЧ-1 (Салех et al., 2007; Hayasaka et al., 2015). Кроме того, дополнительный белок Vpu ВИЧ-1 вызывает подавление экспрессии CCR7 на поверхности ВИЧ-1-инфицированных CD4 ⁺ Т-клеток (Ramirez et al., 2014). В соответствии с этим клиническое исследование показало, что у ВИЧ-1-инфицированных людей отсутствует экспрессия CCR7 на естественных киллерных (NK) клетках (Hong et al., 2012). Исследование коинфекции ВИЧ-1 и ЦМВ продемонстрировало, что большинство (> 70%) эффекторных Т-клеток CD8 ⁺ имеют фенотип CCR7 ^– как в крови, так и в лимфатических узлах (Ellefsen et al., 2002). Кроме того, механистические исследования показали, что gp120 ВИЧ-1 может имитировать последовательности хемокинов и значительно способствовать миграции клеток-мишеней CD4 ⁺ , зависимой от хемокиновых рецепторов, в удаленные лимфатические узлы, что, вероятно, приводит к усиленному распространению вируса (Murphy, 2001; Hayasaka et al. ., 2015).

Аналогичным образом, два предыдущих исследования показали, что у мышей, инфицированных вирусом скрепи (штамм ME7), обнаружено нарушение структуры белой пульпы селезенки и заметно уменьшенные площади Т-зоны в селезенке из-за снижения экспрессии в селезенке CCL19 и CCL21 (Kim и др., 2016, 2018). Более того, снижение экспрессии хемокинов CCL19 и CCL21, хемокинов, возвращающих Т-клетки, привело к частичному отказу от рекрутирования CD4 ⁺ Т-клеток в селезенку, а экспрессия маркера памяти CD44 на CCR7 ^± CD4 ⁺ Т-клеток была снижена при скрейпи. мышей, инфицированных вирусом (штамм ME7), по сравнению с контрольными мышами (таблица 1).Наконец, в селезенках, инфицированных ME7, были обнаружены высокие уровни клеточного прионного белка [PrP (C)] и накопленного PrP (Sc), экспрессируемого фолликулярными DC. Во время заражения респираторными вирусами, такими как респираторно-синцитиальный вирус человека (HRSV), метапневмовирус человека (HMPV) и вирус парагриппа человека 3 типа (HPIV3), могут вызывать неполный или кратковременный вирусспецифический иммунитет. Эти вирусы могут вызывать симптоматические повторные инфекции на протяжении всей жизни без значительных антигенных изменений.Как класс профессиональных презентационных клеток, DC могут обеспечивать презентацию антигена в контексте вирусной инфекции. Однако ДК, происходящие из моноцитов человека (mo-DC), стимулированные HRSV, HMPV или HPIV3, демонстрируют неэффективное увеличение экспрессии CCR7, если не представлена ​​вторичная стимуляция липополисахаридом (LPS) или смесью провоспалительных цитокинов. Напротив, инфекции HRSV и HMPV вызывают меньшую экспрессию CCR7 и менее эффективную миграцию DC в ответ на CCL19, чем HPIV3. Низкая экспрессия CCR7 опосредует неэффективную миграцию ДК, стимулированных HRSV и HMPV, к лимфоидным органам и вызывает нарушение адаптивных ответов на эти вирусы, что в конечном итоге приводит к обильной репликации вируса и повреждению тканей, что приводит к более тяжелому заболеванию (Le Nouën et al. ., 2011; Inchley et al., 2013) (таблица 1).

Таблица 1. Экспрессия CCL19 и его рецептора CCR7 во время вирусных инфекций.

Во время EBV-инфекции экспрессия CCR7, вероятно, играет важную роль в патогенезе. Было показано, что по сравнению с неинфицированными В-клетками миндалин, экспрессия CCR7, которая имеет решающее значение для миграции В-клеток в лимфоидные ткани, снижается со 2-го дня после заражения ВЭБ и не определяется к 14-му дню (Ehlin-Henriksson et al., 2009). (Таблица 1).Кроме того, миграция EBV-инфицированных клеток к CCL19 или CCL21 нарушена, хотя экспрессия CCR7 в инфицированных клетках аналогична таковой в неинфицированных контрольных клетках (Ehlin-Henriksson et al., 2009; Hauser and Legler, 2016; Dunham et al. ., 2017; Wu et al., 2017). CCR7 играет важную роль в переносе В-клеток в лимфоидную ткань, и было показано, что его активация строго зависит от высококонсервативного клеточного фактора связывания ДНК (CBF1), поскольку блокада или дефицит этого фактора приводит к подавлению иммуноглобулина. (Ig) экспрессия в контексте инфекции EBV (Maier et al., 2005, 2006).

Во время инфицирования вирусом гриппа А иммунный ответ на основе Th2 доминирует над иммунным процессом (Doherty et al., 1997). CCL19 / CCL21 и CCR7, как хорошо известно, необходимы для выполнения важной роли рекрутирования Т-клеток в легкие и другие периферические специализированные микросреды в тканях (важные сайты проникновения патогенов). CCR7 играет важную роль в миграции Т-клеток из лимфатических узлов и бляшек Пейера через венулы высокого эндотелия во время иммунной защиты слизистой оболочки (Förster et al., 1999; Дебес и др., 2004). Однако по сравнению с неинфицированными мышами было показано, что экспрессия CCR7 подавляется на специфичных для вируса гриппа CD4 ⁺ Т-клетках, полученных из селезенки, брыжеечных лимфатических узлов (MLN) и легких на пике инфекции (Debes et al. al., 2004) (рис. 2), что указывает на то, что эти клетки утратили способность рециркулировать после реакции на вирусные антигены (Ags).

Рисунок 2. CCL19 и CCR7 опосредуют захват вирусного антигена, активацию и дифференцировку иммуноцитов.Для DC-, B- и T-лимфопоэза характерны последовательные изменения миграционных свойств. Поверхностный рецептор и экспрессия Ig происходит во время Т-лимфопоэза в костном мозге и тимусе во время инициации иммунного ответа и генерации эффекторных Т-клеток для участия в активной защите в местах проникновения вируса в периферических тканях, включая кровь, лимфу, венулы слизистой оболочки и MALT; таким образом, происходит воспаление и создание клеток памяти для иммунного надзора. α4β7, интегрин α4β7; LFA-1, антиген-1, связанный с функцией лимфоцитов; ASC, клетка, секретирующая антитела; MALT, лимфоидная ткань, ассоциированная со слизистой оболочкой.Другие отделы слизистой оболочки: толстая кишка, альвеолы, молочные и слюнные железы, слизистая оболочка половых органов.

Повышенная экспрессия CCR7 в контексте инфекций Denv

Высокая экспрессия CCR7 на иммуноцитах наблюдалась при инфекции DENV. DCs являются наиболее важными клетками-мишенями, и было показано, что экспрессия CCR7 увеличивается на DENV-стимулированных mo-DCs (Wu et al., 2011). Однако mo-DC с повышенной экспрессией CCR7 имеют больше возможностей взаимодействовать с многочисленными Т-клетками и начинают секретировать цитокины, металлопротеиназы и хемокины в Т-зоне дренирующих лимфатических узлов.Клинические проявления инфекции DENV включают лихорадку денге и потенциально фатальные явления, такие как геморрагическая лихорадка денге (DHF) и шоковый синдром денге (DSS). Взаимодействие между DENV и целевыми иммунными эффекторами, цитокинами или хемокинами может привести к развитию тяжелых клинических проявлений, таких как DHF (Wu et al., 2009). В клинической терапии некоторые лекарства, такие как лефлуномид, подавляют чрезмерную продукцию цитокинов и хемокинов из инфицированных DENV mo-DC, подавляя созревание mo-DC (Wu et al., 2011). Точно так же было показано, что инфекция DENV специфически увеличивает уровни мРНК и белка Gal-9. Кроме того, малая интерферирующая РНК Gal-9 подавляет экспрессию CCR7 и подавляет DENV-специфическую миграцию DC к хемоаттрактантам CCL19 и CCL21. Таким образом, ингибитор Gal-9 может быть полезен для предотвращения иммунопатогенеза при инфекции DENV (Hsu et al., 2015). Подобные функциональные молекулы могут быть полезны при разработке лекарств для предотвращения иммунопатогенеза DENV за счет уменьшения количества клеток, экспрессирующих CCR7.

CCL19 помогает установить вирусную интеграцию и задержку, а также подавляет экспрессию CCR7 при инфекции ВИЧ-1

Взаимодействуя со своим рецептором (CCR7), CCL19 может активировать сигнальный путь, позволяющий ВИЧ-1 проникать в ядро ​​покоящихся (памяти) Т-клеток (Saleh et al., 2016; Cameron et al., 2010; Anderson). JL et al., 2016). Скрытая инфекция ВИЧ-1 в памяти покоя CD4 ⁺ Т-лимфоциты является основным препятствием на пути искоренения ВИЧ-1. Обращение латентности провирусов привлекло большое внимание как стратегия лечения ВИЧ-1 (Cillo et al., 2014). Было показано, что обработанные CCL19 CXCR4-экспрессирующие CD4 ⁺ Т-клетки проявляют повышенную способность к продукции ВИЧ-1, тем самым облегчая постинтеграцию провируса и латентность (Anderson J.L. et al., 2016). Кроме того, инокуляция Т-клеток CD4 ⁺ ВИЧ вызывает умеренное подавление (как показано с помощью проточной цитометрии) экспрессии CCR7 и небольшое увеличение экспрессии CCR5 после стимуляции CCL19 (Anderson J.L. et al., 2016). CCR5 представляет собой корецептор, необходимый для проникновения ВИЧ-1 в чувствительные клетки, и является привлекательной мишенью для борьбы с инфекцией ВИЧ-1 (Li et al., 2015). Кроме того, совместное культивирование CCL19 и mDC с CD4 ⁺ Т-клетками оказалось полезным в отношении латентной инфекции CCR5- и CXCR4-тропных вирусов in vitro (Anderson J.L. et al., 2016).

CCR7 необходим для достаточной миграции зрелых дендритных клеток (mDC) и Т-клеток в дренирующие лимфатические узлы после вирусных инфекций

В контексте хронической инфекции HBV мДК являются высоко мигрирующими, что сопровождается усилением экспрессии CCR7 на мДК печени и увеличением ответа на CCL19 (Abe et al., 2004). В двух исследованиях незрелые печеночные DC не реагировали на какие-либо протестированные хемокины, несмотря на экспрессию транскриптов мРНК, кодирующих соответствующие рецепторы для этих хемокинов, и экспрессия CCR7 сильно усиливалась в ответ на созревание DC (Abe et al., 2004; Thomson and Knolle, 2010). Печеночные mDC играют решающую роль в стимулировании иммунной толерантности за счет продукции IL-10 и TGFβ, активации регуляторных Т-клеток или регуляторных B-клеток и подавления пролиферации эффекторных Т-клеток (Abe et al., 2004; Лю и др., 2018). По сравнению с устойчивыми ответами в начале клинического периода, HBV-специфические ответы Т-лимфоцитов CD8 ⁺ довольно слабые и ограниченные, что может привести к персистенции вируса и прогрессированию заболевания (Nitschke et al., 2016; Fisicaro et al., 2017; Wieland и др., 2017). Однако острое воспаление может преобразовывать мДК печени из толерогенного фенотипа, позволяя этим клеткам активировать Т-клетки (Abe et al., 2004; Thomson and Knolle, 2010).

CCR7 может индуцировать миграцию антиген-специфических эффекторных Т-клеток и Т-клеток центральной памяти в лимфатические узлы посредством хемотаксического ответа на CCL19 (Abe et al., 2004). Основной фенотип и функции патоген-специфичных Т-клеток CD8 ⁺ могут различаться при разных вирусных инфекциях (Appay et al., 2002; Romero et al., 2007). Количественный и качественный состав иммунных клеток в печени заметно отличается от такового во вторичных лимфоидных органах, включая селезенку, лимфатические узлы и периферическую кровь. Соотношение CD8 ⁺ / CD4 ⁺ Т-клеток в печени составляет 3,5: 1; однако это соотношение является обратным соотношению 1: 2 CD8 ⁺ / CD4 ⁺ Т-клеток, обнаруженному во вторичных лимфоидных органах (Horst et al., 2016). CD8 ⁺ Т-клетки играют решающую роль в контроле HBV и воспалении печени. В нескольких исследованиях изучалась экспрессия CCR7 HBV-специфическими CD8 ⁺ Т-клетками в контексте хронической инфекции HBV (Boettler et al., 2006; Zhang et al., 2009). Повышающая регуляция экспрессии программируемой смерти-1 (PD-1) может нарушать HBV-специфические ответы Т-клеток CD8 ⁺ памяти, что приводит к функциональному подавлению продукции IFN-γ. Кроме того, блокирование взаимодействий PD-1 / PD-L1 in vitro увеличивает частоту HBV-специфических Т-клеток CD8 ⁺ и усиливает экспрессию CCR7, CD45RA и CD127 в этих клетках, что приводит к увеличению пролиферации клеток и IFN. -γ продукция (Zhang et al., 2009) (таблица 1).

Хронические инфекции с патогенами, передающимися с кровью, такими как ВИЧ-1, HBV и HCV, как правило, увеличивают развитие Т-лимфоцитов гомеостаза памяти (Carotenuto et al., 2011; Cao et al., 2014; Cillo et al., 2014). ; Baskic et al., 2017). Во время первичных вирусных инфекций вирусспецифические Т-клеточные ответы сильны; однако, как только устойчивая инфекция установлена, как вирус-специфические CD4 ⁺ , так и CD8 ⁺ Т-клетки становятся нефункциональными или их трудно обнаружить ex vivo (Cao et al., 2014). Вирус-специфические эффекторные Т-клетки CD8 ⁺ играют решающую роль в устранении инфекций ВИЧ-1, EBV, HBV, CMV и HCV, а паттерны экспрессии CCR7, CD27 и CD28 демонстрируют сходные характеристики во время фазы первичной инфекции и хронической инфекции. фаза хронической инфекции (Appay et al., 2002; Romero et al., 2007). Фенотипы CCR7 ⁺ CD27 ⁺ , CCR7 ^— CD27 ⁺ и CCR7 ^— CD27 ^— могут представлять собой раннюю, медианную и позднюю стадии дифференцировки Т-клеток CD8 ⁺ памяти соответственно. , в то время как подавленная экспрессия этих молекул указывает на неспособность Т-клеток дифференцироваться в направлении эффекторного фенотипа.В нескольких исследованиях сообщается, что удаление эффекторных Т-клеток из кровотока способствует привлечению наивных клеток CCR7 ⁺ , что может привести к нарушению генерации функционально компетентных Т-клеток памяти и неспособности контролировать репликацию вируса (Appay et al. , 2002).

Зрелые дендритные клетки и Т-клетки, которые экспрессируют CCR7, увеличивают скорость передвижения Т-клеток в лимфатических узлах и, таким образом, увеличивают вероятность того, что Т-клетки встречаются с DC (Mora and von Andrian, 2008).При инфицировании вирусом гриппа высокие уровни CCR7 ⁺ IFN-γ ⁺ CD4 ⁺ Т-клеток наблюдались в лимфатических узлах, дренирующих легкие (Debes et al., 2004). Исследование кинетики экспрессии хемокинов показало, что уровни CCL19, CCL22 и CXCL13 значительно повышаются во время третьей волны (от 8 до 24 часов) вирусной инфекции гриппа, что помогает CCR7 ⁺ DC достигать лимфоидных органов. и привлекают наивные Т- и В-клетки (Piqueras et al., 2006) (Таблица 1).

Основными адаптивными иммунными лимфоцитами, присутствующими в легких младенцев, умерших от тяжелой инфекции RSV, являются В-клетки (Welliver et al., 2007; Reed et al., 2009). Фактор дифференцировки B-клеток BAFF является индикатором ответа легочных антител после инфекций HRSV, HMPV, h2N1, бокавируса, риновируса и Mycoplasma pneumoniae (McNamara et al., 2013). CCL19 и другие хемокины, особенно CXCL12, CXCL13 и CCL21, влияют на дифференцировку, миграцию и гомеостаз В-клеток и ДК крови человека (т.е. плазмацитоидные и миелоидные ДК) (Freire-de-Lima et al., 2017; Alturaiki et al., 2018). Сообщалось, что кинетика экспрессии этих хемокинов связана с врожденным иммунным ответом эпителия дыхательных путей на респираторные вирусные инфекции. Было показано, что CCL19 экспрессируется в тканях легких через 1, 2 и 7 дней после заражения RSV (Le Nouën et al., 2011; Inchley et al., 2013; Alturaiki et al., 2018). Однако в контексте инфицирования вирусом гриппа уровни CCL19 и CCL21, как сообщается, повышаются на поздней волне (Comerford et al., 2006). Эти переменные результаты можно объяснить различиями в используемых моделях или методах выборки (Alturaiki et al., 2018) (Таблица 1).

Во время гомеостаза CCR7 регулирует перемещение Т-клеток в лимфоидные органы. Во время инфекций WNV DC CCR7 ⁺ регулируют перемещение Т-клеток, экспрессирующих родственные лиганды CCL19 или CCL21, в лимфатические узлы сразу после инфекции и ограничивают миграцию лейкоцитов в мозг. Гиперцеллюлярность лейкоцитов в центральной нервной системе (ЦНС) способствует виремии ЦНС, нейровоспалению и повышенной смертности.Таким образом, CCR7 действует как фактор ограничения защиты хозяина, ограничивая нейровоспаление во время острой инфекции WNV (Bardina et al., 2017) (Таблица 1).

Взятые вместе, эти данные показывают, что ответы хозяина на вирусные инфекции включают различные эффекторы врожденного и адаптивного иммунитета и что мобилизация лимфоцитов, опосредованная этими эффекторами, должна координироваться для обеспечения защиты. И воспалительные, и гомеостатические хемокины участвуют в контроле за перемещением эффекторных клеток или клеток памяти.Воспалительные хемокины определяют клеточные инфильтраты в местах проникновения патогенов, тогда как воспаление и гомеостатические хемокины регулируют независимый от воспаления, непрерывный транспорт клеток памяти через здоровые периферические ткани.

Сигнальные пути оси CCL19-CCR7 при вирусных инфекциях

Ось CCL19-CCR7 участвует в конститутивной миграции и хоминге лимфоцитов. Кроме того, было показано, что ось CCL19-CCR7 выполняет другие биологические действия, такие как регуляция морфологических изменений DC и развитие Т-клеток тимуса и подавление апоптоза DC, что может привести к регуляции адаптивного иммунитета и толерантности (Yanagawa and Onoe, 2002; Мюллер, Липп, 2003; Санчес-Санчес и др., 2004; Förster et al., 2008; Raju et al., 2015). Эта ось выполняет свои биологические функции за счет активации G-протеин-связанной рецепторной киназы (GPK) / β-аррестина, которая трансдуцирует связывание внеклеточных стимулов с внутриклеточной передачей сигналов (Zidar et al., 2009; Tian et al., 2014). CCL19, но не CCL21, индуцирует устойчивое рекрутирование β-аррестина 2 и приводит к интернализации серин / треонин-фосфорилированного рецептора CCR7 в эндосомные везикулы, тем самым эффективно ограничивая восприимчивость рецептора к внеклеточным лигандам (Kohout et al., 2004) (рисунок 1). Кроме того, было показано, что CCL19 более эффективен, чем CCL21, в активации ERK1 / 2 (часть каскада киназ MAP) через субъединицу Gαi (Kohout et al., 2004; Raju et al., 2015) и повышении Ca ^2+. через субъединицу Gβγ (Yoshida et al., 1998; Otero et al., 2008) (Рисунок 3). CCR7, как гомеостатический хемокиновый рецептор, ингибирует аденилатциклазу и ограничивает уровень внутриклеточного циклического аденозинмонофосфата (цАМФ) и активацию протеинкиназы A (PKA) (Steen et al., 2014; Raju et al., 2015). Подобно другим GPCR, CCR7 играет решающую роль в активации или ингибировании нижестоящих сигнальных адаптеров при вирусных инфекциях через вторичные мессенджеры, промотированные G-белком, включая цАМФ, Ca ²⁺ и фосфоинозитиды (Steen et al., 2014; Raju et al., al., 2015) (рисунок 3). В гомеостатической регуляции GPCR участвуют следующие три основных режима: десенсибилизация (рецептор становится невосприимчивым к продолжающимся стимулам), интернализация (рецепторы физически удаляются с поверхности клетки в результате эндоцитоза) и подавляющая регуляция (уровни клеточных рецепторов снижаются) (Tian et al. al., 2014). Помимо индукции направленного управления в клетках, CCR7 обеспечивает костимуляторные сигналы и сигналы выживания (Bock et al., 2016). Более того, CCR7-опосредованная поляризация и миграция Т-клеток человека, как было установлено, связаны с межбелковыми взаимодействиями в передаче сигналов через множество клеточных компартментов (Raju et al., 2015).

Рисунок 3. сигнальные пути CCL19 и CCR7. Во время вирусных инфекций многие исследования подтвердили идею о том, что взаимодействие между CCL19 и CCR7 способствует повышающей / понижающей регуляции нижележащих сигнальных адаптерных молекул и приводит к антиапоптозу, выживанию клеток, продукции цитокинов, клеточному росту, дифференцировке, хемотаксису. , и миграция и т. д.KSHV, вирус герпеса, связанный с саркомой Капоши; HTLV, вирус Т-клеточного лейкоза человека 1; ВПЧ, вирус папилломы человека.

За последние несколько лет в сигнальных путях CCR7 были зарегистрированы многочисленные связанные с CCL19 сигнальные молекулы-адаптеры, и их специфические функции во время вирусных инфекций суммированы на рисунке 3. Доказано, что вирусы обладают высокоэффективными стратегиями модуляции. и предотвращать передачу апоптотических сигналов, способствующих их инфекциям, через вирусные белки, такие как продукт гена HBx HBV (Shin et al., 2016). Для этого обзора мы провели поиск путей передачи сигналов хемокинов, связанных с CCR7, в базе данных KEGG PATHWAY и обсудили множественные регуляторные механизмы передачи сигналов CCR7 и влияние на функции CCR7 во время вирусных инфекций.

Дополнительный белок Vpu ВИЧ-1 снижает экспрессию CCR7 на CD4 ⁺ Т-клетках (Ramirez et al., 2014). Vpu специфически взаимодействует и колокализуется с CCR7 в сети trans -Гольджи, в которой CCR7 сохраняется. Стимуляция ВИЧ-1-инфицированных первичных CD4 ⁺ Т-клеток с помощью CCL19 снижает мобилизацию Ca ²⁺ , снижает фосфорилирование Erk1 / 2 и препятствует миграции к CCL19 (Ramirez et al., 2014). Исследования, касающиеся передачи сигналов CCL19-CCR7, показали, что индуцированные CCL19 сигнальные белки опосредуют интеграцию ВИЧ-1 в Т-лимфоциты CD4 ⁺ в нескольких сайтах интеграции и что этот процесс подавляется ингибиторами PI3K, NF-κB и MEK / Ras / Сигнальные пути Raf (Raju et al., 2015; Saleh et al., 2016) (Рисунок 3). Недавно Управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов (FDA) одобрило ингибитор янус-киназы (JAK) руксолитиниб, чтобы уменьшить высвобождение множества цитокинов и тем самым предотвратить их влияние на изменение латентного периода у ВИЧ-1-положительных пациентов.Комбинация соединений ингенола с ингибитором JAK может представлять новую стратегию искоренения ВИЧ-1 (Spivak et al., 2016).

Инфекция DCs с помощью DENV вызывает созревание клеток и, вероятно, усиливает миграцию клеток в лимфоидные органы, чтобы способствовать взаимодействиям с T-клетками (Mathew and Rothman, 2008). Через 48 часов после заражения количество CCR7 ⁺ mo-DC увеличивается, и увеличение количества клеток сопровождается значительной активацией сигнального пути COX-2-PGE ₂ в мигрирующих DC (Wu et al. ., 2009). Все ингибиторы MAPK и ингибитор ЦОГ-2 целекоксиб подавляют DENV-индуцированную продукцию PGE ₂ до базовых уровней. Механизмы, участвующие в активации COX-2, включают активацию сигнальных путей IKK-NF-κB и MAPK-activator protein-1 (AP-1) (Wu et al., 2009; Hsu et al., 2015). Было высказано предположение, что несколько предшествующих сигнальных молекул COX-2 могут быть полезны для лечения или контроля вирусных инфекций. Например, блокада ERK, которая находится выше киназы MKK1 / 2, подавляет инфекционность вируса путем ингибирования экспрессии ранних генов при инфекциях CMV (hCMV) человека (Johnson et al., 2001). Кроме того, было показано, что лефлуномид является эффективным терапевтическим препаратом при инфекции DENV. Лефлуномид ингибирует DENV-индуцированную миграцию mo-DC в ответ на хемоаттрактант CCL19 путем подавления экспрессии CCR7 и сигнальных путей NF-κB и AP-1 (Wu et al., 2011).

CCL19 как молекулярный адъювант усиливает вирус-специфические иммунные ответы

Цитокины успешно использовались в качестве молекулярных адъювантов для стимулирования вирус-специфических гуморальных и клеточных иммунных ответов путем изменения величины, интенсивности, характера и продолжительности ответов (Sin et al., 1999; Канагавелу и др., 2012; Гупта и др., 2015; Doosti et al., 2019). Положительные эффекты хемокинов как иммуномодуляторов вакцин против вирусных инфекций еще предстоит изучить. CCL19 был постулирован как многообещающий кандидат в адъюванты для вакцин против рака и инфекционных заболеваний из-за его первостепенной важности в формировании иммунного ответа и его разнообразных эффектов на DC и миграцию и активацию лимфоцитов. CCL19 также контролирует локализацию лимфоцитов во время развития Т-клеток в ответ на иммунизацию.Активированные Т-клетки приводят к изменениям экспрессии различных молекул, включая интегрины (α ₄ β _{3 ,} LFA-1), селектины и хемокиновые рецепторы, что приводит к модуляции ключевых внутриклеточных сигнальных событий, которые способствуют T пролиферация, дифференцировка и миграция клеток в воспаленные ткани (Murdoch and Finn, 2000; Tahamtan et al., 2018; Justo-Junior et al., 2019) (рисунок 2).

В контексте вирусно-нейтрализующих антител (nAbs) исследования показали, что как мономерные gp120, так и тримерные gp140 вакцины ВИЧ-1 вызывают нейтрализующие реакции антител, но все еще не обладают достаточной широтой для эффективной защиты от различных изолятов ВИЧ-1 (García-Arriaza et al. ., 2017; Шен и др., 2017). Вакцины с gB или gD субъединицей HSV-2 могут индуцировать высокие уровни нейтрализующих антител, но не могут эффективно защищать мышей от вирусного заражения (Zhu et al., 2014). Таким образом, могут потребоваться эффективные вакцины для широкой индукции нейтрализации Abs. ДНК-вакцины обычно считаются неоптимальными для индукции гуморальных реакций, особенно у людей. Стратегии преодоления этих ограничений включают оптимизацию плазмидных остовов, использование молекулярных адъювантов и изменение способов доставки.Ранее мы исследовали возможность того, что использование хемокина CCL19 или CCL28 может оптимизировать системные и гуморальные ответы слизистых оболочек на кандидатную вакцину против ВИЧ-1 gp140, которая является основной мишенью для Ab-опосредованных противовирусных функций (Hu et al., 2013). В группе адъюванта CCL19 CCR7 продемонстрировал высокую экспрессию на активированных В-клетках, Т-клетках и ДК во вторичных лимфоидных органах, что было полезно для увеличения вероятности взаимодействий между В-клетками, Т-клетками и ДК в локальной ткани (Таблица 2 ).

Таблица 2. Адъювант на основе CCL19 в вирусных вакцинах.

В контексте клеточных иммунных ответов было исследовано несколько потенциальных ролей молекулярных адъювантов, таких как цитокины и костимулирующие молекулы, в стратегиях вакцинации. В настоящее время разработаны различные перспективные профилактические вакцины, направленные на индукцию значительных вакциноспецифических Т-клеточных ответов (Hartoonian et al., 2014; Rosendahl Huber et al., 2014). Было обнаружено, что увеличение широты индуцированного вакциной ответа Т-клеток полезно против многих хронических патогенов (Kallas et al., 2016; Panagioti et al., 2016). Молекулярный адъювант CCL19 играет важную роль в увеличении доставки вакцин на основе Т-клеток в региональные компартменты Т-клеток посредством эффективной трансдукции гена CCR7, а также участвует в праймировании и подготовке антиген-специфических Т-клеток и производстве АТ (Мюллер и Липп). , 2003; Аритоми и др., 2010).

При хронических вирусных инфекциях B- и T-клетки памяти численно и функционально превосходят нейтрализующие антитела соответствующие наивные клетки-предшественники, которые присутствовали до заражения, поскольку лимфоциты памяти, как правило, вызывают быстрые и мощные реакции воспоминаний (Panagioti et al., 2016, 2018). Поскольку нейтрализующие антитела не могут обеспечить контроль над персистирующими вирусными инфекциями (например, герпесвирусами, ВИЧ-1 и HCV), терапевтическая иммунизация должна быть сосредоточена на создании сильного клеточного Т-клеточного иммунитета и большего количества вирусоспецифичных иммуноцитов памяти. Все живые аттенуированные, синтетические и субъединичные вакцины способны вызывать центральные Т-клетки памяти, эффекторные Т-клетки памяти и резидентные Т-клетки памяти, и эти ответы сильно зависят от добавления адъювантов и пути введения (Schaerli and Moser, 2005; Мюллер и др., 2013; Хан и др., 2017; Гебхардт и др., 2018).

Существенные доказательства указывают на то, что реципиенты вакцины с адъювантом CCL19 продуцируют CD4 ⁺ / CD8 ⁺ Т-клетки быстрее и на более высоких уровнях, чем реципиенты, которым вводили контрольный вектор, лишенный CCL19 (таблица 2). В исследовании, в котором применялась вакцина против HSV-1 и плазмиды, кодирующие CCL19 (pCCL19) и HSV-1 gB (pgB), DC CCR7 ^{с высоким уровнем} были активированы и мигрировали, что привело к усилению захвата антигена и, предположительно, к увеличению прайминга наивных Т-клеток. .По сравнению с доставленным только pCCL19, совместная доставка pCCL19 и pgB вызывала заметное увеличение CD11c ⁺ DC в легких. В группе, получавшей pCCL19, Т-клетки CD8 ⁺ , выделенные из легких, продуцировали больше IFN-γ. Соответственно, оказывается, что доставка кода CCL19 может приводить к индукции функциональной памяти CD8 ⁺ Т-клеток (Lee et al., 2003; Toka et al., 2003). Высокий уровень IFN-γ, наблюдаемый в этих CD8 ⁺ T-клетках, может указывать на то, что повышенный потенциал секретирования IFN-γ играет заметную защитную роль при летальном заражении HSV-1 слизистой оболочки.В наших исследованиях вакцин против ВИЧ-1 и ВПГ-2, адъювантная доставка кода CCL19 обеспечивает сбалансированное усиление специфичных для gp140 ВИЧ-1 и HSV-2 gB ответов Th2 / Th3 (Hu et al., 2013; Yan et al., 2015 ). Такие улучшения, по-видимому, связаны с мобилизацией обильной миграции иммуноцитов CCR7 ⁺ во вторичные лимфоидные органы и ткань слизистой оболочки. Аналогичным образом, предыдущее исследование вакцины против ВГС показало, что CCL19 способствует активации DC и CD4 ⁺ Т-клеток, усиливает накопление Т-клеток CD8 ⁺ и помогает привлекать редкие вирус-специфические Т-клетки в контексте вакцинации ядерной ДНК ВГС в мыши (Hartoonian et al., 2014). CCL19 в качестве молекулярного адъюванта помогает повысить чувствительность наивных Т-клеток к презентации Ag низкой плотности. Такие функциональные исследования могут быть полезны при разработке вакцины против вируса человека.

Что касается вирусных проблем, было проверено, может ли усиленный иммунитет, опосредованный адъювантом CCL19, защитить животных от инфекций слизистой оболочки половых путей, и предыдущие исследования показали, что CCL19 усиливает защитные ответы на заражение HSV-1 (Lee et al., 2003; Toka и другие., 2003). В этих исследованиях было показано, что схема защитной вакцинации CCL19 вызывает повышенные уровни gB-специфических IgG и IgA Ab в сыворотке и влагалище HSV-1 посредством интраназальной иммунизации слизистой оболочки. CCL19, по-видимому, играет ключевую роль в увеличении ответов Ab (уровни общих антител, вирусспецифичных антител и нейтрализующих антител). Кроме того, CCL19 усиливал gB-специфические иммунные ответы за счет улучшения кинетики и распределения адаптивного иммунного ответа на кодируемый антиген и защищал животных от генитальной инфекции HSV-2.Наконец, результаты показали, что слитые конструкции индуцировали высокие уровни gB-специфических IgG и IgA-антител к HSV-2 в сыворотке мышей и вагинальных жидкостях. В другом исследовании мы обнаружили, что слитая конструкция gB-CCL19 проявляла более сильную способность увеличивать количество иммуноцитов CCR7 ⁺ во вторичной лимфоидной ткани и клеток IgA ⁺ в участках слизистой оболочки (рис. 2). Повышенные системные и влагалищные АТ слизистой оболочки защищали тестируемых мышей от смертельного интравагинального заражения HSV-2 in vivo (Yan et al., 2015). Эти результаты могут обеспечить эффективную стратегию создания вакцин против инфекции слизистых оболочек вирусами, передаваемыми половым путем.

Заключение и перспективы использования CCL19 для профилактики вирусных инфекций

Этот обзор направлен на то, чтобы выяснить, как мы можем применить текущее понимание функций CCL19 и CCR7, чтобы лучше понять патогенез вирусных инфекций и лучше лечить или предотвращать вирусные заболевания. CCL19 и CCR7 играют важную роль в балансе между иммунитетом и толерантностью.CCL19 способствует индуцированной активацией гибели клеток (AICD) в антиген-специфических CD4 ⁺ Т-клетках, и этот хемокин регулирует не только мобилизацию Т-клеток, но также постактивационную судьбу Т-клеток (Yasuda et al., 2007; Förster et al. др., 2008). Это ключевой шаг к пониманию соответствующих исходных программных сигналов, поскольку сигнальные пути CCR7, вызываемые CCL19 во время прайминга или бустинга, влияют на развитие лимфоцитов. Информация, касающаяся различий в анатомическом расположении, активации и дифференцировке между Т-клетками памяти в лимфоидных органах и неиндуцирующими лимфоидными органами, также может быть очень ценной (Thomson and Knolle, 2010).Мы считаем, что недавние достижения в области стимуляции передачи сигналов клеток-мишеней в сочетании с животными моделями, экспрессирующими вирусные антигены, могут дать возможность напрямую ответить на некоторые из этих вопросов на живых животных. Такая работа не только улучшит наше понимание экспрессии CCL19 и CCR7 и их функций при вирусных инфекциях, но также может предоставить инструменты для разработки новых терапевтических стратегий для лечения вирусных инфекций и предотвращения вторжения патогенов.

Известно, что несколько хемокинов, нацеленных на лимфоциты, такие как CCL19, CCL21 и CCL28, важны для регуляции адаптивных иммунных ответов во время вирусной инфекции, и их взаимодействие с родственными рецепторами может привести к усилению активации, размножения и выживаемости Т-клеток, а также установление долговременной памяти. Наиболее важной особенностью иммунной системы является ее способность вызывать защитные иммунные ответы против патогенов, сохраняя при этом толерантность к аутоантигенам и безвредным агентам окружающей среды.Следовательно, хемокины могут служить эффективными иммуномодулирующими компонентами профилактических вакцин против хронических вирусов (Hartoonian et al., 2014; Kallas et al., 2016).

Авторские взносы

YY, RC, XW и KH проанализировали данные. YY подготовил рукопись. LH, ML и QH просмотрели и доработали рукопись. Все авторы прочитали и одобрили окончательную рукопись.

Финансирование

Эта работа финансировалась Научно-технологическим проектом Технологического бюро Уси (CSE31N1607), Проектом Нанкинского медицинского университета (2015NJMUZD078), Программой ключевых медицинских талантов Уси (ZDRC024), Проектом расширения соответствующих технологий Комиссии по здравоохранению и планированию семьи Уси (MS201702), Национальным Фонд естественных наук Китая (81701550 и 81572009), Программа открытого исследовательского фонда Государственной ключевой лаборатории вирусологии Китая (2019IOV005) и Deutsche Forschungsgemeinschaft (RTG1949 и Transregio TRR60).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могут быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Сноски

Список литературы

Абэ М., Захорчак А., Колвин Б. и Томсон А. (2004). Миграционные ответы мышиных печеночных миелоидных, лимфоидных и плазмацитоидных дендритных клеток на хемокины СС. Трансплантация 78, 762–765.DOI: 10.1097 / 01.TP.0000130450.61215.3B

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Alturaiki, W., McFarlane, A. J., Rose, K., Corkhill, R., McNamara, P. S., Schwarze, J., et al. (2018). Экспрессия фактора дифференцировки B-клеток BAFF и хемокина CXCL13 на мышиной модели инфекции респираторно-синцитиальным вирусом . Цитокин 110, 267–271. DOI: 10.1016 / j.cyto.2018.01.014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Андерсон, К., Солари Р. и Пиз Дж. Э. (2016). Предвзятый агонизм хемокиновых рецепторов: препятствия или возможности для открытия лекарств? J. Leukoc. Биол. 99, 901–909. DOI: 10.1189 / jlb.2MR0815-392R

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Андерсон, Дж. Л., Мота, Т. М., Эванс, В. А., Кумар, Н., Резаи, С. Д., Чеонг, К. и др. (2016). Понимание факторов, которые модулируют установление латентного периода ВИЧ в покоящихся CD4 + Т-клетках in vitro . PLoS One 11: e0158778.DOI: 10.1371 / journal.pone.0158778

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Аппей В., Данбар П. Р., Каллан М., Кленерман П., Гиллеспи Г. М. А., Папаньо Л. и др. (2002). Память CD8 + Т-клетки различаются по фенотипу дифференцировки при различных стойких вирусных инфекциях. Nat. Med. 8, 379–385. DOI: 10,1038 / нм0402-379

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Аритоми, К., Кувабара, Т., Танака, Ю., Накано, Х., Ясуда Т., Исикава Ф. и др. (2010). Измененная продукция антител и функция Т-хелперов у мышей, лишенных хемокинов CCL19 и CCL21-Ser. Microbiol. Иммунол. 54, 691–701. DOI: 10.1111 / j.1348-0421.2010.00266.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Барди, Г., Липп, М., Баггиолини, М., и Лутшер, П. (2001). Хемокиновый рецептор CCR7 Т-клеток интернализуется при стимуляции ELC, но не SLC. евро. J. Immunol. 31, 3291–3297.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Бардина, С. В., Браун, Дж. А., Михлмайр, Д., Хоффман, К. В., Сум, Дж., Плетнев, А. Г. и др. (2017). Хемокиновый рецептор Ccr7 ограничивает смертельный энцефалит, вызванный вирусом Западного Нила. J. Virol. 91, e02409 – e02416. DOI: 10.1128 / jvi.02409-16

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Баскич Д., Вукович В. Р., Попович С., Джурджевич П., Зарич М., Николич И. и др. (2017). Цитокиновый профиль при хроническом гепатите С: наблюдение. Цитокин 96, 185–188. DOI: 10.1016 / j.cyto.2017.04.008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Биркенбах, М., Йозефсен, К., Яламанчили, Р., Ленуар, Г., и Кифф, Э. (1993). Гены, индуцированные вирусом Эпштейна-Барра: первые рецепторы пептидов, связанных с G-белками, специфичные для лимфоцитов. J. Virol. 67, 2209–2220.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Бок, А., Бермудес, М., Кребс, Ф., Матера, К., Чиринда, Б., Сюдов, Д., и другие. (2016). Ансамбли связывания лиганда определяют дифференцированную агонистическую эффективность рецептора, связанного с G-белком. J. Biol. Chem. 291, 16375–16389. DOI: 10.1074 / jbc.M116.735431

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Boettler, T., Panther, E., Bengsch, B., Nazarova, N., Spangenberg, H.C., Blum, H.E., et al. (2006). Экспрессия альфа-цепи рецептора интерлейкина-7 (CD127) на вирус-специфических CD8 + Т-клетках идентифицирует функционально и фенотипически определенные Т-клетки памяти во время острой разрешающейся вирусной инфекции гепатита В. J. Virol. 80, 3532–3540. DOI: 10.1128 / jvi.80.7.3532-3540.2006

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кэмерон П. У., Салех С., Саллманн Г., Соломон А., Уайтман Ф., Эванс В. А. и др. (2010). Установление латентного периода ВИЧ-1 в покоящихся CD4 + Т-клетках зависит от индуцированных хемокинами изменений в актиновом цитоскелете. Proc. Natl. Акад. Sci. США 107, 16934–16939. DOI: 10.1073 / pnas.1002894107

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Цао, В., Цю, З., Чжу, Т., Ли, Ю., Хань, Ю., и Ли, Т. (2014). CD8 + Т-клеточные ответы, специфичные для корового белка вируса гепатита В у пациентов с хронической инфекцией вируса гепатита В. J. Clin. Virol. 61, 40–46. DOI: 10.1016 / j.jcv.2014.06.022

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Каротенуто П., Арсен А., Остерхаус А. Д. и Понтесилли О. (2011). Взаимные изменения наивных и эффекторных / Т-лимфоцитов CD8 + памяти при хронической вирусной инфекции гепатита В. Viral Immunol. 24, 27–33. DOI: 10.1089 / vim.2010.0067

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Силло, А. Р., Соболевски, М. Д., Бош, Р. Дж., Файн, Э., Пятак, М. мл., Коффин, Дж. М. и др. (2014). Количественная оценка изменения латентного периода ВИЧ-1 в покоящихся CD4 + Т-клетках у пациентов, получающих супрессивную антиретровирусную терапию. Proc. Natl. Акад. Sci. США 111, 7078–7083. DOI: 10.1073 / pnas.1402873111

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Комерфорд, И., Харата-Ли Ю., Бантинг М. Д., Грегор К., Кара Э. Э. и МакКолл С. Р. (2013). Множество функций и комплексная регуляция оси хемокинов CCR7 / CCL19 / CCL21 в адаптивной иммунной системе. Cytokine Growth Factor Rev. 24, 269–283. DOI: 10.1016 / j.cytogfr.2013.03.001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Комерфорд И., Миласта С., Морроу В., Миллиган Г. и Ниббс Р. (2006). Хемокиновый рецептор CCX-CKR обеспечивает эффективное удаление CCL19 in vitro . евро. J. Immunol. 36, 1904–1916. DOI: 10.1002 / eji.200636327

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Damås, J. K., Oktedalen, O., Ueland, T., Landrø, L., Barstad, J., Müller, F., et al. (2012). Повышенные уровни CCL19 у пациентов с развитым синдромом приобретенного иммунодефицита (СПИД). Clin. Exp. Иммунол. 167, 492–498. DOI: 10.1111 / j.1365-2249.2011.04524.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

de Paz, J.Л., Мозман, Э. А., Ноти, К., Полито, Л., фон Андриан, У. Х. и Зеебергер, П. Х. (2007). Профилирование гепарин-хемокиновых взаимодействий с использованием синтетических инструментов. ACS Chem. Биол. 2, 735–744. DOI: 10.1021 / cb700159m

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Debes, G.F., Bonhagen, K., Wolff, T., Kretschmer, U., Krautwald, S., Kamradt, T., et al. (2004). Экспрессия CC-хемокинового рецептора 7 эффекторными / CD4 + Т-клетками памяти зависит от антигенной специфичности и тканевой локализации во время инфицирования вирусом гриппа А. J. Virol. 78, 7528–7535. DOI: 10.1128 / jvi.78.14.7528-7535.2004

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Доэрти П. К., Топхэм Д. Дж., Трипп Р. А., Кардин Р. Д., Брукс Дж. У. и Стивенсон П. Г. (1997). Эффекторные CD4 + и CD8 + Т-клеточные механизмы в борьбе с респираторными вирусными инфекциями. Immunol. Ред. 159, 105–117. DOI: 10.1111 / j.1600-065x.1997.tb01010.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Дусти, М., Насири, М., Насири, К., Тахмуреспур, М., и Зибаи, С. (2019). Иммуногенная оценка иммуно-доминантных эпитопов вируса ящура, связанных с IL-2 / FcIgG, у мышей BALB / c. Microb. Патог. 132, 30–37. DOI: 10.1016 / j.micpath.2019.04.019

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Dunham, J., van Driel, N., Eggen, B.J., Paul, C., ‘t Hart, BA., Laman, J. D., et al. (2017). Анализ перекрестного взаимодействия В-клеток, инфицированных вирусом Эпштейна-Барра, с Т-клетками у мартышек. Clin. Пер. Иммунол. 6: e127. DOI: 10.1038 / cti.2017.1

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Элин-Хенрикссон, Б., Лян, В., Кагиджи, А., Мовафи, Ф., Кляйн, Г., и Нильссон, А. (2009). Изменения в хемокинах и экспрессии хемокиновых рецепторов на В-клетках миндалин при инфицировании вирусом Эпштейна-Барра. Иммунология 127, 549–557. DOI: 10.1111 / j.1365-2567.2008.03029.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Эллефсен, К., Харари, А., Шампань, П., Барт, П. А., Секали, Р. П., и Панталео, Г. (2002). Распределение и функциональный анализ Т-клеточных ответов CD8 против вирусов памяти при ВИЧ-1 и цитомегаловирусных инфекциях. евро. J. Immunol. 32, 3756–3764.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Физикаро, П., Барили, В., Монтанини, Б., Ачерби, Г., Феррачен, М., Герриери, Ф. и др. (2017). Устранение митохондриальной дисфункции может восстановить противовирусную активность истощенных HBV-специфических CD8 T-клеток при хроническом гепатите B. Nat. Med. 23, 327–336. DOI: 10,1038 / нм.4275

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Förster, R., Schubel, A., Breitfeld, D., Kremmer, E., Renner-Müller, I., Wolf, E., et al. (1999). CCR7 координирует первичный иммунный ответ, создавая функциональную микросреду во вторичных лимфоидных органах. Ячейка 99, 23–33. DOI: 10.1016 / s0092-8674 (00) 80059-8

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Фрейре-де-Лима, Л., Нарди, А. Ф. Ф. Р., Рамос-Джуниор, Э. С., Конде, Л., Сантос Лемос, Дж., Фонсека, Л. М. Д. и др. (2017). Клетки множественной миеломы экспрессируют ключевые иммунорегуляторные цитокины и модулируют миграционный ответ моноцитов. Фронт. Med. 4:92. DOI: 10.3389 / fmed.2017.00092

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гарсия-Арриаса, Дж., Пердигеро, Б., Хини, Дж. Л., Симан, М. С., Монтефиори, Д. К., Йейтс, Н. Л. и др. (2017). Вакцины-кандидаты от ВИЧ / СПИДа на основе репликационно-компетентного рекомбинантного поксвируса NYVAC-C-KC, экспрессирующего тримерный gp140 и вирусоподобные частицы, происходящие из gag, или без вирусной молекулы B19, которая ингибирует тип I Интерферон активирует соответствующие ВИЧ-1-специфические B- и Т-клетки иммунные функции у нечеловеческих приматов. J. Virol. 91, e02182 – e02198. DOI: 10.1128 / jvi.02182-16

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гебхардт, Т., Палендира, У., Чарке, Д. К., и Бедуи, С. (2018). Резидентные Т-клетки памяти в тканевом гомеостазе, хронической инфекции и надзоре за раком. Immunol. Ред. 283, 54–76. DOI: 10.1111 / imr.12650

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гриффит, Дж. У., Сокол, К. Л., и Ластер, А.Д. (2014). Хемокины и хемокиновые рецепторы: позиционирующие клетки для защиты хозяина и иммунитета. Annu. Rev. Immunol. 32, 659–702. DOI: 10,1146 / аннурев-иммунол-032713-120145

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Гупта, С., Кларк, Э. С., Термини, Дж. М., Буше, Дж., Канагавелу, С., ЛеБранш, К. С., и др. (2015). Молекулярные адъюванты ДНК-вакцины SP-D-BAFF и SP-D-APRIL усиливают иммунный ответ против gp120 и увеличивают титры нейтрализующих антител к ВИЧ-1. J. Virol. 89, 4158–4169. DOI: 10.1128 / jvi.02904-14

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хан, Ю. В., Алеяс, А. Г., Джордж, Дж. А., Ким, С. Дж., Ким, Х. К., Ю, Д. Дж. И др. (2009). Генетический совместный перенос лигандов CCR7 усиливает иммунитет и продлевает выживаемость против вирулентного заражения вирусом псевдобешенства. Immunol. Cell Biol. 87, 91–99. DOI: 10.1038 / icb.2008.69

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хартуниан, К., Сепехризаде, З., Табатабай Язди, М., Джанг, Ю.С., Лангроуди, Л., Амир Калванах, П. и др. (2014). Усиление иммунных ответов путем совместной доставки хемокиновой плазмиды CCL19 / MIP-3beta с коровой ДНК / белковой иммунизацией HCV. Hepat. Пн. 14: e14611. DOI: 10.5812 / hepatmon.14611

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хаузер, М. А., Леглер, Д. Ф. (2016). Общие и предвзятые пути передачи сигналов хемокинового рецептора CCR7, вызываемые его лигандами CCL19 и CCL21 в лейкоцитах. J. Leukoc. Биол. 99, 869–882. DOI: 10.1189 / jlb.2MR0815-380R

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хаясака Х., Кобаяси Д., Йошимура Х., Накаяма Э. Э., Сиода Т. и Миясака М. (2015). Ось Gp120 / CXCR4 ВИЧ-1 способствует CCR7-лиганд-зависимой миграции CD4-Т-клеток: образование гомо- и CCR7 / CXCR4-гетероолигомеров CCR7 как возможный механизм повышения регуляции функционального CCR7. PLoS One 10: e0117454. DOI: 10,1371 / журнал.pone.0117454

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хьорто, Г. М., Ларсен, О., Стин, А., Даугвилайте, В., Берг, К., Фарес, С., и др. (2016). Дифференциальное нацеливание на CCR7 в дендритных клетках тремя природными CC-хемокинами. Фронт. Иммунол. 7: 568. DOI: 10.3389 / fimmu.2016.00568

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хонг, Х.С., Ахмад, Ф., Эберхард, Дж. М., Бхатнагар, Н., Боллманн, Б.А., Keudel, P., et al. (2012). Потеря экспрессии CCR7 на NK-клетках CD56bright связана с фенотипом, подобным NK-клеткам CD56dimCD16 +, и коррелирует с вирусной нагрузкой ВИЧ. PLoS One 7: e44820. DOI: 10.1371 / journal.pone.0044820.t001

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хорст, А. К., Нойман, К., Диль, Л., и Тигс, Г. (2016). Модуляция толерантности печени обычными и нетрадиционными антиген-презентирующими клетками и регуляторными иммунными клетками. Ячейка. Мол. Иммунол. 13, 277–292. DOI: 10.1038 / cmi.2015.112

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Сюй, Ю. Л., Ван, М. Ю., Хо, Л. Дж., Хуанг, К. Ю., и Лай, Дж. Х. (2015). Повышающая регуляция галектина-9 вызывает миграцию клеток в дендритных клетках человека, инфицированных вирусом денге. J. Cell. Мол. Med. 19, 1065–1076. DOI: 10.1111 / JCMM.12500

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ху, К., Луо, С., Тонг, Л., Хуанг, X., Цзинь, В., Хуанг, В. и др. (2013). CCL19 и CCL28 усиливают иммунный ответ слизистой оболочки и системный иммунный ответ на gp140 ВИЧ-1 путем мобилизации реагирующих иммуноцитов во вторичные лимфатические узлы и ткань слизистой оболочки. J. Immunol. 191, 1935–1947. DOI: 10.4049 / jimmunol.1300120

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Hu, Z., Li, Y., Van Nieuwenhuijze, A., Selden, H.J., Jarrett, A.M., Sorace, A.G., et al. (2017). CCR7 модулирует образование регуляторных Т-клеток тимуса, изменяя состав компартмента дендритных клеток тимуса. Cell Rep. 21, 168–180. DOI: 10.1016 / j.celrep.2017.09.016

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Инчли, К. С., Остерхольт, Х. К. Д., Сонеруд, Т., Фьяерли, Х. О., и Накстад, Б. (2013). Подавление IL7R, CCR7 и TLR4 в пуповинной крови детей с заболеванием респираторно-синцитиальным вирусом . J. Infect. Дис. 208, 1431–1435. DOI: 10.1093 / infdis / jit336

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Джафарнеджад, М., Завьеха, Д. К., Брук, Б. С., Ниббс, Р. Дж. Б. и Мур, Дж. Э. (2017). Новая вычислительная модель предсказывает ключевые регуляторы образования градиента хемокинов в лимфатических узлах и сайт-специфические роли CCL19 и ACKR4. J. Immunol. 199, 2291–2304. DOI: 10.4049 / jimmunol.1700377

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Джонсон, Р.А., Ма, Х.Л., Юрочко, А.Д., Хуанг, Э.С. (2001). Роль активности киназы MKK1 / 2 в цитомегаловирусной инфекции человека. J. Gen. Virol. 82, 493–497. DOI: 10.1099 / 0022-1317-82-3-493

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хусто-Джуниор, А.С., Вилларехос, Л.М., Лима, Х.Т.В., Надруз, В. мл., Спозито, А.С., Мамони, Р.Л. и др. (2019). Моноциты пациентов с нестабильной стенокардией экспрессируют высокие уровни хемокинов и рецепторов распознавания образов. Цитокин 113, 61–67. DOI: 10.1016 / j.cyto.2018.06.008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Каллас, Э., Хуйк, К., Тюрк, С., Паускар, М., Йыгеда, Э. Л., Шунина, М. и др. (2016). Распределение Т-клеток в отношении коинфекций ВИЧ / ВГВ / ВГС и внутривенного употребления наркотиков. Viral Immunol. 29, 464–470. DOI: 10.1089 / vim.2016.0057

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Канагавелу, С. К., Снарски, В., Термини, Дж. М., Гупта, С., Барзи, С., Райт, Дж. А. и др. (2012). Адъюванты с растворимыми мульти-тримерными лигандами суперсемейства TNF усиливают иммунный ответ на вакцину ДНК Gag ВИЧ-1. Vaccine 30, 691–702. DOI: 10.1016 / j.vaccine.2011.11.088

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Хан, А.А., Шривастава, Р., Чентуфи, А.А., Критцер, Э., Чилукури, С., Гарг, С., и др. (2017). Увеличение числа и функции ВПГ-1-специфических CD8 + эффекторных Т-клеток памяти и резидентных в ткани Т-клеток памяти в латентно инфицированных ганглиях тройничного нерва снижает рецидивирующую инфекцию и заболевание глазным герпесом. J. Immunol. 199, 186–203.DOI: 10.4049 / jimmunol.1700145

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, С., Хан, С., Ким, Т., Нам, Дж., Ким, Ю.С., Чой, Э.К. и др. (2018). Продолжительный фолликулярный ответ Т-хелперных Т-клеток у мышей, инфицированных скрепи ME7. Прион 12, 1–8. DOI: 10.1080 / 19336896.2018.1458573

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ким, С., Хан, С., Ли, Х. С., Ким, Ю. С., Чой, Э. К., и Ким, М. Ю. (2016). Нарушение структуры селезенки и экспрессии хемокинов у мышей, инфицированных скрепи ME7. Иммунобиология 221, 871–878. DOI: 10.1016 / j.imbio.2016.03.008

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Кохут, Т. А., Николас, С. Л., Перри, С. Дж., Рейнхарт, Г., Юнгер, С., и Струтерс, Р. С. (2004). Дифференциальная десенсибилизация, фосфорилирование рецептора, рекрутирование бета-аррестина и активация ERK1 / 2 двумя эндогенными лигандами хемокинового рецептора CC 7. J. Biol. Chem. 279, 23214–23222. DOI: 10.1074 / jbc.M402125200

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лауфер, Дж.М., Киндингер, И., Артингер, М., Паули, А., и Леглер, Д. Ф. (2019). CCR7 рекрутируется в иммунологический синапс, действует как костимуляторная молекула и управляет кластеризацией LFA-1 для эффективной адгезии Т-клеток через ZAP70. Фронт. Иммунол. 9: 3115. DOI: 10.3389 / fimmu.2018.03115

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ле Ноуэн, К., Хиллиер, П., Винтер, К. К., Маккарти, Т., Рабин, Р. Л., Коллинз, П. Л. и др. (2011). Низкая CCR7-опосредованная миграция дендритных клеток, происходящих из моноцитов человека, в ответ на респираторно-синцитиальный вирус человека и метапневмовирус человека. PLoS Pathog. 7: e1002105. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1002105

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли Ю., Эо С. К., Роуз Р. Дж. Д. и Роуз Б. Т. (2003). Влияние предварительного воздействия ДНК лиганда CCR7 на величину и продолжительность иммунитета. Вирусология 312, 169–180. DOI: 10.1016 / s0042-6822 (03) 00199-5

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ли, К., Гуань, X., Ду, Т., Цзинь, В., Ву, Б., Лю Ю. и др. (2015). Ингибирование ВИЧ-1-инфекции первичных CD4 + Т-клеток путем редактирования генов CCR5 с использованием CRISPR / Cas9, доставляемого аденовирусом. J. Gen. Virol. 96, 2381–2393. DOI: 10.1099 / vir.0.000139

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Лю, Дж., Ю, К., Ву, В., Хуанг, X., Бруринг, Р., Вернер, М., и др. (2018). Стимуляция TLR2 усиливает опосредованную внутрипеченочными миелоидными клетками толерантность к Т-клеткам за счет индукции размножения купферовских клеток и продукции IL-10. J. Immunol. 200, 2341–2351. DOI: 10.4049 / jimmunol.1700540

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Майер С., Сантак М., Мантик А., Грабусич К., Креммер Э., Хаммершмидт В. и др. (2005). Соматический нокаут CBF1 в линии B-клеток человека показывает, что индукция CD21 и CCR7 с помощью EBNA-2 строго зависит от CBF1 и что подавление иммуноглобулина M частично не зависит от CBF1. J. Virol. 79, 8784–8792. DOI: 10.1128 / jvi.79.14.8784-8792.2005

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Майер С., Стаффлер Г., Хартманн А., Хёк Дж., Хеннинг К., Грабусич К. и др. (2006). Клеточные гены-мишени ядерного антигена 2 вируса Эпштейна-Барра. J. Virol. 80, 9761–9771. DOI: 10.1128 / jvi.00665-06

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мэтью А. и Ротман А. Л. (2008). Понимание вклада клеточного иммунитета в патогенез болезни денге. Immunol. Ред. 225, 300–313. DOI: 10.1111 / j.1600-065X.2008.00678.x

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Макнамара, П.С., Фонсека, А.М., Ховарт, Д., Коррейя, Дж. Б., Слупски, Дж. Р., Триник, Р. Е. и др. (2013). Респираторно-синцитиальный вирус инфицирование эпителиальных клеток дыхательных путей, in vivo, и in vitro, , поддерживает ответ легочных антител, индуцируя экспрессию фактора дифференцировки B-клеток BAFF. Грудь 68, 76–81. DOI: 10.1136 / thoraxjnl-2012-202288

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мюллер С. Н., Гебхардт Т., Карбоне Ф. Р. и Хит В. Р. (2013). Подмножества Т-клеток памяти, паттерны миграции и местожительство в тканях. Annu. Rev. Immunol. 31, 137–161. DOI: 10.1146 / annurev -munol-032712-095954

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Мердок К. и Финн А. (2000). Хемокиновые рецепторы и их роль в воспалительных и инфекционных заболеваниях. Кровь 95, 3032–3043.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Нагира М., Имаи Т., Хиешима К., Кусуда Дж., Риданпяя М., Такаги С. и др. (1997). Молекулярное клонирование нового хемокина вторичной лимфоидной ткани хемокина CC человека, который является мощным хемоаттрактантом для лимфоцитов и отображается на хромосоме 9p13. J. Biol. Chem. 272, 19518–19524. DOI: 10.1074 / jbc.272.31.19518

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ничке, К., Люксенбургер Х., Кираит М.М., Тимм Р. и Нойман-Хефелин К. (2016). CD8 + Т-клеточные ответы при гепатите B и C: (HLA-) A, B и C гепатита B и C. Dig. Дис. 34, 396–409. DOI: 10.1159 / 000444555

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ohl, L., Mohaupt, M., Cheloth, N., Hintzen, G., Kiafard, Z., Zwirner, J., et al. (2004). CCR7 регулирует миграцию дендритных клеток кожи в воспалительных и стационарных условиях. Иммунитет 21, 279–288.DOI: 10.1016 / j.immuni.2004.06.014

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Отеро К., Эйселе П. С., Шойбле К., Гроеттруп М. и Леглер Д. Ф. (2008). Отдельные мотивы в хемокиновом рецепторе CCR7 регулируют передачу сигнала, перенос рецепторов и хемотаксис. J. Cell. Sci. 121, 2759–2767. DOI: 10.1242 / JCS

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Панагиоти, Э., Кленерман, П., Ли, Л. Н., ван дер Бург, С.Х., Аренс Р. (2018). Особенности эффективных Т-клеточных вакцин против хронических вирусных инфекций. Фронт. Иммунол. 9: 276. DOI: 10.3389 / fimmu.2018.00276

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Панагиоти, Э., Редекер, А., ван Дуикерен, С., Франкен, К. Л., Драйфхаут, Дж. У., ван дер Бург, Ш. и др. (2016). Широкий спектр индуцированных синтетической длиннопептидной вакциной CD8 + Т-клеточных ответов определяет эффективность против инфекции цитомегаловируса мышей. PLoS Pathog. 12: e1005895. DOI: 10.1371 / journal.ppat.1005895

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Пикерас, Б., Коннолли, Дж., Фрейтас, Х., Палука, А. К., и Баншеро, Дж. (2006). При воздействии вируса миелоидные и плазмоцитоидные дендритные клетки продуцируют 3 волны различных хемокинов для набора иммунных эффекторов. Кровь 107, 2613–2618. DOI: 10.1182 / blood2005-07-2965

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Potsch, C., Ферингер Д. и Пирчер Х. (1999). Отчетливые паттерны миграции наивных и эффекторных Т-лимфоцитов CD8 в корреляции селезенки с экспрессией рецептора CCR7 и реактивностью хемокинов. евро. J. Immunol. 29, 3562–3570.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Раджу Р., Гадах С., Гопал П., Джордж Б., Адвани Дж., Соман С. и др. (2015). Дифференциальная лиганд-сигнальная сеть системы CCL19 / CCL21-CCR7. База данных 2015: bav106. DOI: 10.1093 / база данных / bav106

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рамирес, П.W., Famiglietti, M., Sowrirajan, B., DePaula-Silva, A. B., Rodesch, C., Barker, E., et al. (2014). Пониженная модуляция CCR7 vpu ВИЧ-1 приводит к нарушению миграции и хемотаксической передачи сигналов внутри CD4 + Т-клеток. Cell Rep. 7, 2019–2030. DOI: 10.1016 / j.celrep.2014.05.015

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рид, Дж. Л., Велливер, Т. П., Симс, Г. П., МакКинни, Л., Велозо, Л., Авендано, Л. и др. (2009). Врожденные иммунные сигналы модулируют противовирусные и полиреактивные реакции антител во время тяжелой инфекции Respiratory Syncytial Virus . J. Infect. Дис. 199, 1128–1138. DOI: 10.1086 / 597386

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ромеро П., Циппелиус А., Курт И., Питтет М. Дж., Туврей К., Янку Э. М. и др. (2007). Четыре функционально различных популяции CD8 + Т-лимфоцитов эффекторной памяти человека. J. Immunol. 178, 4112–4119. DOI: 10.4049 / jimmunol.178.7.4112

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Rosendahl Huber, S., ван Бик, Дж., де Йонге, Дж., Луйтьес, В., и ван Баарл, Д. (2014). Т-клеточные ответы на вирусные инфекции — возможности для пептидной вакцинации. Фронт. Иммунол. 5: 171. DOI: 10.3389 / fimmu.2014.00171

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Рот, А., и фон Андриан, У. Х. (2004). Хемокины в врожденной и адаптивной защите хозяина: основная хемокинезийская грамматика для иммунных клеток. Annu. Rev. Immunol. 22, 891–928. DOI: 10.1146 / annurev.immunol.22.012703.104543

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Салех С., Лу, Х. К., Эванс, В., Хариссон, Д., Чжоу, Дж., Яворовски, А. и др. (2016). Интеграция ВИЧ и установление латентного периода в обработанных CCL19 покоящихся CD4 + Т-клетках требует активации NF-κB. Ретровирология 13:49. DOI: 10.1186 / s12977-016-0284-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Салех, С., Соломон, А., Вайтман, Ф., Ксилага, М., Кэмерон П. У. и Левин С. Р. (2007). Лиганды CCR7 CCL19 и CCL21 увеличивают способность CD4 + Т-клеток памяти в состоянии покоя к инфекции ВИЧ-1, что является новой моделью латентного периода ВИЧ-1. Кровь 110, 4161–4164. DOI: 10.1182 / кровь-2007-06-097907

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Санчес-Санчес, Н., Риол-Бланко, Л., де ла Роса, Г., Пуч-Крегер, А., Гарсия-Бордас, Дж., Мартин, Д. и др. (2004). Хемокиновый рецептор CCR7 индуцирует внутриклеточную передачу сигналов, которая ингибирует апоптоз зрелых дендритных клеток. Кровь 104, 619–625. DOI: 10.1182 / кровь-2003-11-3943

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шен X., Богерс В. М., Йейтс Н. Л., Феррари Г., Дей А. К., Уильямс В. Т. и др. (2017). Поперечное сшивание CD4-миметического минипротеина с env gp140 ВИЧ-1 изменяет кинетику и специфичность ответов антител против env ВИЧ-1 у макак. J. Virol. 91, e00401 – e00417. DOI: 10.1128 / jvi.00401-17

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Шин, Г.К., Кан, Х. С., Ли, А. Р. и Ким, К. Х. (2016). Аутофагия, вызванная вирусом гепатита B, нацелена на деградацию TNFRSF10B / рецептора смерти 5, чтобы ограничить ответ TNFSF10 / TRAIL. Аутофагия 12, 2451–2466. DOI: 10.1080 / 15548627.2016.1239002

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Син, Дж. И., Ким, Дж. Дж., Арнольд, Р. Л., Шрофф, К. Э., МакКаллус, Д., Пачук, К., и др. (1999). Ген IL-12 в качестве адъюванта ДНК-вакцины в модели герпеса на мышах: IL-12 усиливает опосредованный CD4 + Т-клетками Th2-типа защитный иммунитет против заражения вирусом простого герпеса-2. J. Immunol. 162, 2912–2921.

PubMed Аннотация | Google Scholar

Спивак А. М., Ларрагойт Э. Т., Колетти М. Л., Маседо А. Б., Мартинс Л. Дж., Боске А. и др. (2016). Ингибирование киназы Janus подавляет вызванное PKC высвобождение цитокинов, не влияя на изменение латентности ВИЧ-1 ex vivo. Ретровирология 13:88. DOI: 10.1186 / s12977-016-0319-0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Стин, А., Ларсен, О., Тиле, С., и Розенкильде, М. М. (2014). Смещенная и независимая от g-белка передача сигналов хемокиновых рецепторов. Фронт. Иммунол. 5: 277. DOI: 10.3389 / fimmu.2014.00277

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тахамтан А., Таваколи-Яраки М., Шадаб А., Резаи Ф., Мараши С. М., Шокри Ф. и др. (2018). Роль каннабиноидного рецептора 1 в иммунопатологии респираторно-синцитиального вируса . Viral Immunol. 31, 292–298. DOI: 10.1089 / vim.2017.0098

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Тока, Ф. Н., Геринска, М., и Роуз, Б. Т. (2003). Доставка лигандов CCR7 в качестве молекулярных адъювантов усиливает защитный иммунный ответ против вируса простого герпеса типа 1. J. Virol. 77, 12742–12752. DOI: 10.1128 / jvi.77.23.12742-12752.2003

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Unsoeld, H., Krautwald, S., Voehringer, D., Kunzendorf, U., и Пирчер, Х. (2002). Передний край: CCR7 + и CCR7- Т-клетки памяти не различаются по функции непосредственных эффекторных клеток. J. Immunol. 169, 638–641. DOI: 10.4049 / jimmunol.169.2.638

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Велливер Т. П., Гарофало Р. П., Хосакоте Ю., Хинц К. Х., Авендано Л., Санчес К. и др. (2007). Тяжелое заболевание нижних дыхательных путей человека, вызываемое респираторно-синцитиальным вирусом и вирусом гриппа, характеризуется отсутствием реакции легочных цитотоксических лимфоцитов. J. Infect. Дис. 195, 1126–1136. DOI: 10.1086 / 512615

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Виланд Д., Хофманн М. и Тимм Р. (2017). Преодоление истощения CD8 + T-клеток при вирусном гепатите: уроки на мышиной модели и клинические перспективы. Dig. Дис. 35, 334–338. DOI: 10.1159 / 000456584

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wilflingseder, D., Müllauer, B., Schramek, H., Banki, Z., Pruenster, M., Dierich, M.P., et al. (2004). ВИЧ-1-индуцированная миграция дендритных клеток, происходящих из моноцитов, связана с дифференциальной активацией путей MAPK. J. Immunol. 173, 7497–7505. DOI: 10.4049 / jimmunol.173.12.7497

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wu, L., Ehlin-Henriksson, B., Zhou, X., Zhu, H., Ernberg, I., Kis, L. L., et al. (2017). Вирус Эпштейна-Барра (EBV) обеспечивает факторы выживания линиям EBV + диффузной большой B-клеточной лимфомы (DLBCL) и модулирует индуцированный цитокинами специфический хемотаксис в EBV + DLBCL. Иммунология 152, 562–573. DOI: 10.1111 / imm.12792

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ву, В. Л., Хо, Л. Дж., Чанг, Д. М., Чен, К. Х. и Лай, Дж. Х. (2009). Запуск миграции DC посредством стимуляции вирусом денге COX-2-зависимых сигнальных каскадов in vitro подчеркивает важность этих каскадов за пределами воспаления. евро. J. Immunol. 39, 3413–3422. DOI: 10.1002 / eji.200939306

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Wu, W.Л., Хо, Л. Дж., Чен, П. К., Цай, Ю. Т., Сю, С. Т., Чанг, Д. М. и др. (2011). Иммуносупрессивные эффекты и механизмы лефлуномида при инфицировании вирусом денге дендритных клеток человека. J. Clin. Иммунол. 31, 1065–1078. DOI: 10.1007 / s10875-011-9578-7

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Янь, Ю., Ху, К., Дэн, X., Гуань, X., Луо, С., Тонг, Л. и др. (2015). Иммунизация гибридными конструкциями HSV-2 gB-CCL19 защищает мышей от летального вагинального заражения. J. Immunol. 195, 329–338. DOI: 10.4049 / jimmunol.1500198

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Ясуда Т., Кувабара Т., Накано Х., Аритоми К., Онодера Т. и др. (2007). Хемокины CCL19 и CCL21 способствуют индуцированной активацией гибели антиген-отвечающих Т-клеток. Кровь 109, 449–456. DOI: 10.1182 / кровь-2006-04-018101

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Йошида, Р., Нагира, М., Китаура, М., Имагава, Н., Имаи, Т., и Йоши, О. (1998). Вторичный хемокин лимфоидной ткани является функциональным лигандом хемокинового рецептора CCR7. J. Biol. Chem. 273, 7118–7122. DOI: 10.1074 / jbc.273.12.7118

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Zhang, Z., Jin, B., Zhang, J. Y., Xu, B., Wang, H., Shi, M., et al. (2009). Динамическое снижение экспрессии PD-1 коррелирует с развитием HBV-специфических Т-лимфоцитов памяти CD8 у пациентов с острым самоограничивающимся гепатитом B. J. Hepatol. 50, 1163–1173. DOI: 10.1016 / j.jhep.2009.01.026

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Чжу, X. П., Мухаммад, З., Ван, Дж. Г., Линь, В., Го, С. К., и Чжан, В. (2014). Вакцина против HSV-2: текущее состояние и понимание факторов для разработки эффективной вакцины. Вирусы 6, 371–390. DOI: 10.3390 / v6020371

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Зидар Д.А., Скрипка Д.Д., Уэлен Э.Дж. И Лефковиц Р. Дж. (2009). Селективное участие G-протеиновых рецепторных киназ (GRK) кодирует различные функции смещенных лигандов. Proc. Natl. Акад. Sci. США 106, 9649–9654. DOI: 10.1073 / pnas.0

PubMed Аннотация | CrossRef Полный текст | Google Scholar

Локальное ингибирование аргиназы не влияет на расширение кожных сосудов или потоотделение у молодых и пожилых мужчин во время упражнений

Старение связано со снижением кожных сосудорасширяющих свойств (20–23, 26, 46, 47) и потоотделением (24, 25, 30–33). , 46) реакция как на физический, так и на пассивно индуцированный тепловой стресс, с уменьшенным тепловыделением всего тела во время упражнений, очевидным у взрослых в возрасте от 40 лет (30).Этим возрастным нарушениям способствуют изменения факторов, влияющих на потерю тепла на уровне конечного органа (то есть кожной сосудистой сети и эккринных потовых желез). Например, оксид азота (NO) необходим для полного проявления кожной вазодилатации и потоотделения во время теплового стресса (упражнения или пассивное нагревание) у молодых (9, 12, 20–23, 37–39, 47, 52). Однако у пожилых людей его вклад в эти реакции потери тепла снижен (12, 13, 20–23, 31, 33, 47, 48).

Потенциально в основе ослабленной NO-зависимой кожной вазодилатации и реакции потоотделения у пожилых людей является повышенная активность аргиназы в коже.По сравнению с NO-синтазой (NOS) аргиназа предпочтительно связывает l-аргинин, общий предшественник обоих ферментов. Таким образом, возрастное повышение активности аргиназы может реципрокно ингибировать выработку эндогенного NO из-за истощения субстрата (5, 53). Было показано, что во время пассивного нагревания всего тела у пожилых людей локальное ингибирование аргиназы увеличивает кожную вазодилатацию до уровня, сопоставимого с их более молодыми аналогами (22, 23, 47). Кроме того, исследования азота мочевины эккринного пота (первичный конечный продукт аргиназы) показывают, что аргиназа также локализуется в потовых железах (18), а повышенное содержание мочевины в поте у пожилых людей по сравнению с молодыми людьми (2) может указывать на повышенную регуляцию активности потовых желез. активность аргиназы при старении.Тем не менее, роль аргиназы в обеспечении кожной вазодилатации и потоотделения во время упражнений в настоящее время неизвестна.

Восстановление эндогенного синтеза NO посредством ингибирования аргиназы может изменить терморегуляторные реакции во время теплового стресса при физической нагрузке у пожилых людей. Таким образом, целью данного исследования было оценить влияние местного ингибирования аргиназы на расширение кожных сосудов и потоотделение у молодых и пожилых мужчин во время физических упражнений в жару (35 ° C). Была выдвинута гипотеза, что ингибирование аргиназы усилит расширение кожных сосудов и потоотделение у пожилых, но не у молодых мужчин.

Этическое разрешение

Это исследование было проведено в соответствии с Хельсинкской декларацией и одобрено Советом по этике медицинских наук и научных исследований Оттавского университета. Перед их участием в исследовании у всех добровольцев было получено информированное согласие.

Участники

Всего в исследовании приняли участие 9 молодых людей и 16 мужчин старшего возраста (см. Результаты по физическим характеристикам). Из этих людей все молодые и девять пожилых мужчин прошли тест с физической нагрузкой и тепловым стрессом, а остальные семь пожилых мужчин участвовали в последующем вторичном исследовании пассивного нагрева всего тела.Все участники были здоровы (т. Е. Не имели в анамнезе сердечно-сосудистых, метаболических или респираторных заболеваний и в настоящее время не принимали лекарства, связанные с этими состояниями) и обычно активны (т.е. выполняли ≥30 минут структурированной физической активности минимум 2 раза в неделю). определяется по стандартизированной анкете (29). Мужчины были выбраны с учетом потенциальной модуляции механизмов, лежащих в основе потери тепла, связанных с колебаниями уровня женских половых гормонов (например, эстрогена и прогестерона) (6, 7).Кроме того, женщины демонстрируют измененную способность рассеивать тепло (для данного уровня теплового стресса), независимо от половых различий в морфологии тела и аэробной способности, по сравнению с мужчинами (14–16). В то время как у молодых людей связанные с полом различия в терморегуляционной функции обычно возникают при более высоких тепловых нагрузках, результаты нашей лаборатории показывают, что старение по-разному влияет на реакцию потери тепла между полами (32, 49). В настоящее время мы изучаем влияние возраста и пола на терморегуляторную функцию.Однако в начале настоящего исследования мы решили протестировать мужчин, чтобы избежать потенциально мешающего влияния секса на реакции терморегуляции.

Схема эксперимента

Каждый участник выполнил одну предварительную и одну экспериментальную сессию (вызванный физической нагрузкой или пассивно индуцированный тепловой стресс). Перед началом каждого сеанса участников проинструктировали воздерживаться от алкоголя, кофеина и / или интенсивных физических нагрузок в течение как минимум 24 часов. Кроме того, участникам было рекомендовано выпивать 500 мл воды накануне вечером, а также ~ 2 часа перед каждым сеансом, чтобы обеспечить адекватную гидратацию.Во время предварительного сеанса измерялись рост, масса и плотность тела. Для тех, кто участвовал в протоколе упражнений и теплового стресса, также была определена пиковая скорость поглощения кислорода (V̇O _2peak ). Рост и массу тела измеряли с помощью ростометра (Detecto, модель 2391, Webb City, MO) и цифрового высокопроизводительного весового терминала (модель CBU150X, Mettler Toledo Inc., Миссиссауга, Канада) соответственно. Площадь поверхности тела рассчитывалась по измерениям роста и массы тела (8).Систолическое и диастолическое давление в состоянии покоя измеряли путем ручной аускультации с использованием аттестованного сфигмоманометра с ртутной колонкой (Baumanometer Standby Model, WA Baum Co, Copiague, NY). Плотность тела измерялась методом гидростатического взвешивания и использовалась для расчета процента жира в организме (45). V̇o _2peak оценивали с помощью автоматизированной системы непрямой калориметрии (MCD Medgraphics Ultima Series; MGC Diagnostics, MN) во время протокола прогрессивной инкрементной езды на велосипеде на полуприцепном велоэргометре (Corival, Lode B.В., Гронинген, Нидерланды). Протокол начался с 1 минуты езды на велосипеде при начальной нагрузке 100 Вт для молодых людей и 60 Вт для пожилых людей. После первой минуты рабочая нагрузка была увеличена на 20 Вт / мин до тех пор, пока не наступила волевая усталость и / или участник больше не мог поддерживать частоту вращения педалей> 50 оборотов в минуту.

Как упоминалось выше, экспериментальный сеанс состоял либо из теплового стресса, вызванного физической нагрузкой, либо из разогрева всего тела в покое. В обоих протоколах участники предоставили образец мочи для измерения удельного веса мочи (рефрактометр общего содержания твердых веществ Reichert TS 400, Reichert Inc., Депью, штат Нью-Йорк) по прибытии в лабораторию перед базовым измерением массы тела. Участники с удельным весом мочи <1,020 считались достаточно гидратированными для начала экспериментальной сессии (3). Участникам, превышающим этот порог ( n = 4), давали дополнительно 500 мл водопроводной воды (~ 2 часа до начала упражнения). После этого 3 микродиализных волокна (Bioanalytical Systems Inc., West Lafayette, IN) были вставлены в дермальный слой кожи тыльной стороны предплечья, в то время как участники отдыхали в вертикальном сидячем положении в термонейтральной (~ 24 ° C) экспериментальной комнате.Волокна вводили в асептических условиях, продвигая иглу 25 калибра на 20-25 мм. Иглу извлекали после того, как волокно было пропущено через просвет, оставив 10-миллиметровую диализную мембрану внутри дермального слоя. Каждое волокно прикреплялось к коже хирургической лентой на расстоянии ~ 2–4 см друг от друга. Затем все волокна перфузировали лактатным раствором Рингера в течение ~ 30 мин со скоростью 4 мкл / мин с помощью микроперфузионного насоса (модель 400, CMA, Microdialysis, Solna, Швеция). Каждый участок кожи был оборудован инструментами для измерения местного кожного кровотока и скорости потоотделения.

Физико-тепловая нагрузка.

В протоколе упражнений и теплового стресса участники входили в камеру с терморегулированием, регулируемую до 35 ° C и 20% относительной влажности после введения микродиализного волокна. Участников усаживали на велоэргометр полуприлегающего типа, в то время как волокна для микродиализа перфузировали со скоростью 4 мкл / мин с помощью насоса для микроинфузии (модель 400, CMA Microdialysis) либо 1 ) лактатом Рингера (контроль), 2 ) 10. мМ N ^G -нитро- _L -метиловый эфир аргинина (L-NAME; Sigma-Aldrich, St.Louis, MO), чтобы ингибировать активность NOS, или 3 ) 5 мМ N ^ω -гидрокси-нор-аргинин (Nor-NOHA; Sigma-Aldrich) + 5 мМ S- (2-бороноэтил) -1-цистеин ( BEC; Sigma-Aldrich) ингибиторы аргиназы для усиления эндогенного синтеза NO (Nor-NOHA + BEC). Перфузия каждого волокна поддерживалась в течение 60 минут перед сбором исходных данных, а также на протяжении всего последующего протокола физической нагрузки и теплового стресса (описанного ниже). Концентрация каждого препарата была основана на предыдущей работе (9, 12, 13, 20–23). , 38, 39, 48).Важно отметить, что между введением микродиализных волокон и началом сбора исходных данных (30-минутная обработка + 60-минутная перфузия лекарственного средства) был оставлен период ~ 90 минут, что является достаточным для разрешения местной воспалительной реакции, связанной с введением волокон. (4).

После ~ 60-минутного периода досудебной перфузии последовал 10-минутный сбор исходных данных, за которым последовали 2 последовательных 30-минутных цикла полулежа на велосипеде при метаболической выработке тепла 400 Вт. Упражнения выполнялись с фиксированной скоростью теплопродукции. для обеспечения одинаковых побуждений к потере тепла всем телом между группами (27, 40), и эта рабочая нагрузка была выбрана потому, что при этой тепловой нагрузке наблюдалось возрастное снижение NO-зависимой CVC и потоотделения (9, 10).За каждой тренировкой следовало 20 минут восстановления. Был использован протокол периодических упражнений, учитывая потенциальное влияние нескольких сеансов упражнений на механизмы, лежащие в основе реакции потери тепла. Вкратце, восстановление после упражнений связано с ослаблением кожной вазодилатации и потоотделения до уровня, близкого к исходному, с последующим быстрым усилением этих реакций после начала следующей тренировки (27). Хотя эта реакция в первую очередь связана с нетепловыми факторами (т.е., разгрузка барорецепторов), неизвестно, влияют ли на механизмы, регулирующие потерю тепла на уровне конечного органа, факторы, связанные с выполнением нескольких тренировок (т. е. дифференцированная гипертермия). После второго восстановления каждое волокно для микродиализа перфузировали 50 мМ нитропруссида натрия со скоростью 6 мкл / мин для оценки максимального кожного кровотока. Измерение артериального давления проводилось после достижения стабильного плато кожного кровотока (~ 20–30 мин) для определения максимальной проводимости кожных сосудов (CVC _max ).Остальные инструменты были затем удалены, и была получена окончательная масса тела обнаженного тела.

Пассивное отопление вторичное кабинет.

Как показано в результатах (см. Ниже), мы не наблюдали значительного влияния ингибирования аргиназы на реакцию потери тепла у пожилых мужчин во время упражнений, что, по-видимому, расходится с результатами предыдущей работы, в которой использовалось пассивное нагревание всего тела (20, 21 ). По этой причине после завершения исследования теплового стресса при физической нагрузке было проведено вторичное исследование пассивного нагрева всего тела с целью сравнения эффектов ингибирования аргиназы на реакцию потери тепла между активным (упражнения) и пассивно индуцированным тепловым стрессом.В этом протоколе участники оставались в термонейтральной комнате (~ 24 ° C) в полуприлегающем положении после введения 3 микродиализных волокон в костюме с водной перфузией с трубчатой ​​подкладкой. Затем волокна перфузировали в течение ~ 60 минут теми же агентами, что и в протоколе физической нагрузки и теплового стресса (то есть, Рингера, L-NAME и Nor-NOHA + BEC), при этом температура костюма поддерживалась на уровне 34 ° C. Следовательно, как и в случае протокола физической нагрузки и теплового стресса, между введением микродиализных волокон и началом сбора данных прошло ~ 90 минут.Затем температура воды, перфузирующей костюм, была увеличена до 49,5 ° C, чтобы инициировать нагрев всего тела. Перфузия каждого микродиализного волокна поддерживалась на протяжении всего пассивного нагревания. Как только температура пищевода повысилась на 0,8 ° C (эквивалентно пиковому увеличению температуры пищевода во время физической нагрузки и теплового стресса), температура воды в костюме была снижена до 40 ° C, и был определен CVC _max , как описано в предыдущем разделе.

Измерения

Температура пищевода измерялась в обоих протоколах с помощью детского термопарного зонда диаметром ~ 2 мм (Mon-a-therm, Mallinckrodt Medical, St.Луи, штат Миссури) вводится через нос и продвигается на 40 см. У одного старшего участника (физическая нагрузка-тепловой стресс) была измерена барабанная температура из-за непереносимости пищеводного зонда. Средняя температура кожи была рассчитана с использованием 4 участков кожи, взвешенных по региональным пропорциям: 30% груди, 30% бицепса, 20% квадрицепса и 20% икр (44), измеренных во время протокола упражнений. Из-за технических трудностей средняя температура кожи не была указана для одного молодого участника. Данные о температуре собирались с помощью модуля сбора данных с частотой дискретизации 15 с, отображались и записывались с помощью программного обеспечения LabVIEW (версия 7.0; National Instruments, Техас).

Как при физической нагрузке, так и при пассивном нагревании всего тела систолическое и диастолическое давление измеряли путем ручной аускультации каждые 5 минут с использованием проверенного сфигмоманометра с ртутной колонкой (Baumanometer Standby Model, WA Baum Co). Среднее артериальное давление рассчитывалось как диастолическое давление плюс одна треть разницы между систолическим и диастолическим давлением (т. Е. Пульсовое давление). Данные о частоте пульса записывались и сохранялись каждые 5 с во время тренировки с использованием Polar Coded WearLink и передатчика, интерфейса Polar RS400 и программного обеспечения Polar Trainer 5 (Polar Electro, Oy, Kempele, Финляндия).

Кожный поток эритроцитов, показатель кожного кровотока, выраженный в единицах перфузии, был измерен локально с частотой дискретизации 32 Гц с помощью лазерной доплеровской флоуметрии (PeriFlux System 5000, Perimed, Стокгольм, Швеция) с использованием встроенных лазерных доплеровских флоуметрических зондов. с 7-лазерной антенной (модель 413, Perimed). Каждый зонд помещали над центром каждого микродиализного волокна и помещали в специализированную вентилируемую потовую капсулу (см. Ниже). CVC рассчитывали как поток эритроцитов через кожу, деленный на среднее артериальное давление (единицы перфузии / мм рт. Ст.), И представляли как процент от CVC _max .

Специализированные вентилируемые капсулы, предназначенные для покрытия всей площади кожи, перфузируемой микродиализным волокном (1,1 см ² ), использовались для измерения локальной скорости потоотделения (41). Каждую капсулу помещали непосредственно в центр каждой волоконной мембраны и прикрепляли к коже с помощью двустороннего клея и местного клея для кожи (Collodion HV, Mavidon Medical Products, Lake Worth, FL). Сухой сжатый воздух пропускался через каждую капсулу с постоянной скоростью потока (0,4 л / мин), в то время как емкостная гигрометрия (модель HMT333, Vaisala, Хельсинки, Финляндия) использовалась для измерения содержания воды в выходящем воздухе.Соединения между газовыми баллонами и потовыми капсулами, а также между потовыми капсулами и гигрометрами состояли из длинных виниловых трубок, позволяющих уравновешивать температуру газа с температурой окружающей среды. Скорость местного потоотделения рассчитывалась каждые 5 с с использованием содержания воды в выходящем воздухе, умноженного на скорость потока, и нормирована на площадь поверхности капсулы (мг · мин ^-1 · см ^-2 ).

Во время упражнений выработка эндогенного тепла оценивалась как скорость метаболизма за вычетом внешней работы (27).Концентрации кислорода и углекислого газа в выдыхаемом воздухе анализировались с помощью электрохимических газоанализаторов (AMETEK model S-3A / 1 и CD3A, Applied Electrochemistry, Pittsburg, PA), которые были откалиброваны с использованием газовой смеси с известными концентрациями. Для калибровки турбинного вентилометра использовали 3-литровый шприц. Участники были одеты в полнолицевые маски (модель 7600 V2, Ханс-Рудольф, Канзас-Сити, Миссури), прикрепленные к 2-ходовому Т-образному невозвратному клапану (модель 2700, Ханс-Рудольф). Коэффициент поглощения кислорода и респираторного обмена были получены как средние за 30 с и впоследствии использовались для расчета скорости метаболизма (42).

Перед каждым протоколом эксперимента удельный вес мочи (показатель состояния жидкости в организме) оценивался с помощью портативного рефрактометра общего твердого вещества (модель TS400, Reichter Inc., Depew, NY).

Анализ данных

Для протокола физической нагрузки и теплового стресса локальная ЦВК предплечья и скорость потоотделения на каждом участке лечения, а также температура пищевода и кожи (как абсолютные значения, так и повышение от исходного уровня) и частота сердечных сокращений были представлены как средние за 5 минут. данных, записанных в конце каждого из следующих периодов времени: исходный уровень, упражнение 1 и упражнение 2.Данные артериального давления были представлены как среднее значение двух измерений, выполненных в течение 10 минут в конце каждого периода времени. CVC _max определяли на основе усредненных данных CVC в течение минимум 2 минут после достижения плато во время процедуры максимальной кожной вазодилатации в конце каждого протокола. В протоколе пассивного нагрева определялись средние значения CVC и скорости потоотделения за интервал времени, соответствующий повышению температуры пищевода на 0,6 ° C (0,55–0,64 ° C) и 0.8 ° C (0,75–0,84 ° C) (аналогично повышению температуры пищевода, отмеченному у пожилых людей во время упражнения 1 и 2 протокола упражнений с теплом, соответственно).

Статистический анализ

Локальная CVC предплечья и скорость потоотделения во время физической нагрузки и теплового стресса были проанализированы с использованием трехстороннего дисперсионного анализа смешанной модели (ANOVA) с факторами периода времени (повторяется; три уровня: исходный уровень, упражнение 1, и упражнение 2), место лечения (повторное; три уровня: контроль, L-NAME и Nor-NOHA + BEC) и возрастная группа (неповторяющаяся; два уровня: молодой и старший).Двухсторонний смешанный модельный ANOVA был выполнен с факторами времени (три уровня) и возраста (два уровня) для температуры тела (т.е. пищевода и средняя кожа) и сердечно-сосудистых (т.е. среднего артериального давления и частоты сердечных сокращений) переменных между возрастом. группы. Аналогичным образом, двухфакторный смешанный модельный дисперсионный анализ с факторами места лечения (три уровня) и возраста (два уровня) также использовался для оценки локальной CVC предплечья _max (выраженной в единицах перфузии / мм рт. Ст.), Полученной во время максимальной кожной протокол расширения сосудов.Для протокола пассивного нагрева всего тела CVC и скорость потоотделения анализировались с помощью двухфакторного дисперсионного анализа с повторными измерениями с факторами стадии (повторяется; два уровня: повышение температуры пищевода на 0,6 ° C и 0,8 ° C) и лечения (три уровней). CVC _max оценивали с помощью однофакторного дисперсионного анализа с повторными измерениями (фактор места обработки).

Для теста физической нагрузки и теплового стресса апостериорные попарные сравнения проводились с использованием двусторонних парных (время, лечение) или непарных (возрастная группа) тестов t .Основываясь на предыдущих наблюдениях ослабленной и усиленной CVC с L-NAME и Nor-NOHA + BEC, соответственно (22, 23), ответы во время протокола пассивного нагрева сравнивали с использованием односторонних тестов t . Поправка Холма-Бонферрони использовалась для учета множественных сравнений. Различия в физических характеристиках участников, удельном весе мочи и процентном изменении массы тела между возрастными группами в протоколе упражнений и теплового стресса оценивались с помощью независимых выборочных тестов Стьюдента t (двусторонние). P ≤ 0,05 был установлен как уровень статистической значимости. Все значения были представлены как средние (стандартное отклонение).

R.D.M., N.F., L.M.A. и G.P.K. задуманное и спланированное исследование; R.D.M., N.F. и G.W.M. проведенные эксперименты; R.D.M. проанализированные данные; R.D.M., N.F., G.W.M., L.M.A., P.B., R.J.S. и G.P.K. интерпретированные результаты экспериментов; R.D.M. подготовленные фигурки; R.D.M. и G.W.M. составленная рукопись; R.D.M., N.F., G.W.M., L.M.A., P.B., R.J.S. и G.P.K. отредактированная и исправленная рукопись; Р.D.M., N.F., G.W.M., L.M.A., P.B., R.J.S. и G.P.K. утверждена окончательная версия рукописи.

% PDF-1.7 % 248 0 объект > эндобдж xref 248 119 0000000016 00000 н. 0000003688 00000 н. 0000003949 00000 н. 0000003976 00000 н. 0000004034 00000 н. 0000004070 00000 н. 0000004506 00000 н. 0000004660 00000 н. 0000004816 00000 н. 0000004987 00000 н. 0000005140 00000 н. 0000005262 00000 н. 0000005384 00000 п. 0000005507 00000 н. 0000005629 00000 н. 0000005751 00000 п. 0000005873 00000 н. 0000006017 00000 н. 0000006140 00000 н. 0000006263 00000 н. 0000006385 00000 н. 0000006507 00000 н. 0000006629 00000 н. 0000006782 00000 н. 0000006862 00000 н. 0000006942 00000 н. 0000007023 00000 н. 0000007103 00000 н. 0000007183 00000 н. 0000007263 00000 н. 0000007343 00000 п. 0000007421 00000 н. 0000007501 00000 н. 0000007580 00000 н. 0000007660 00000 н. 0000007739 00000 н. 0000007819 00000 п. 0000007897 00000 п. 0000007976 00000 н. 0000008054 00000 н. 0000008133 00000 п. 0000008211 00000 н. 0000008292 00000 н. 0000008549 00000 н. 0000009483 00000 н. 0000009769 00000 н. 0000010488 00000 п. 0000010946 00000 п. 0000011369 00000 п. 0000011447 00000 п. 0000012005 00000 п. 0000012258 00000 п. 0000016410 00000 п. 0000016783 00000 п. 0000017191 00000 п. 0000024820 00000 п. 0000025082 00000 п. 0000025461 00000 п. 0000026425 00000 п. 0000027439 00000 п. 0000027916 00000 н. 0000033180 00000 п. 0000033531 00000 п. 0000033919 00000 п. 0000034140 00000 п. 0000034396 00000 п. 0000035133 00000 п. 0000035386 00000 п. 0000035718 00000 п. 0000035852 00000 п. 0000036739 00000 п. 0000036885 00000 п. 0000037359 00000 п. 0000042068 00000 н. 0000042409 00000 п. 0000042807 00000 п. 0000043033 00000 п. 0000043431 00000 п. 0000043632 00000 п. 0000043689 00000 п. 0000044500 00000 п. 0000045395 00000 п. 0000046208 00000 п. 0000047128 00000 п. 0000047967 00000 п. 0000048647 00000 н. 0000049603 00000 п. 0000071807 00000 п. 0000085292 00000 п. 0000087560 00000 п. 0000087836 00000 п. 0000088199 00000 п. 0000088342 00000 п. 0000089800 00000 п. 00000